簡述薄層色譜法的使用方法 薄層色譜使用方法
時間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點擊:
【*** 使用手冊】薄層色譜法是指根據(jù)各成分對同一吸附劑的吸附能力不同,在流動相流動固定相的過程中,連續(xù)發(fā)生吸附、解吸、再吸附、再解吸,實現(xiàn)各成分的相互分離的吸附薄層色譜法分離法。 以下,根據(jù)網(wǎng)上的資料,整理在薄層色譜法的使用中可以做的步驟 1.制定薄層板,將固定相和水用研缽向一個方向研磨混合,除去表面氣泡后,放入涂布器,將涂布器順暢地移動到玻璃板上進行涂布,取下涂布在薄層上的玻璃板,放置在水平臺上在室溫下干燥后,在規(guī)定的溫度下干燥,放入干燥劑進行干燥 使用前檢查均勻度。 2.點樣除另有規(guī)定外,點基線距底邊規(guī)定距離,點直徑和點間距與紙色譜法相同,點間距看點擴散情況,不影響檢測 做樣品的時候,注意不要損傷薄層表面?! ?.展開油缸時,事先用展開劑使之飽和。 在汽缸中加入足夠量的展開劑,將與汽缸相同高度、寬度的濾紙貼在墻壁上,一端浸在展開劑中,密封汽缸頂部的蓋子,使系統(tǒng)平衡,或按照本文的規(guī)定操作。將樣品薄片放入展開缸的展開劑中,浸漬在展開劑中的深度從薄片的底邊開始 (請勿將樣品點浸入展開劑),密封蓋板,展開至規(guī)定距離取出薄板晾干,按照各品種以下的規(guī)定進行檢查。 4.用薄層掃描儀掃描檢測色譜斑點,或直接掃描色譜斑點到薄層上定量上可以利用薄層掃描法。薄層掃描的方法除另有規(guī)定外,還依據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特征和使用說明根據(jù)具體情況,選擇吸收法或熒光法,以二波長或一波長進行掃描。 對薄層掃描的結(jié)果產(chǎn)生影響原因很多,在保證供試品的斑點在**濃度范圍內(nèi)形成線形的基礎(chǔ)上,與供試品對照品在同一薄層展開掃描,比較定量,減少誤差。 有各種各樣的供試品只有得到分離度和再現(xiàn)性好的薄層色譜,才能得到滿意的結(jié)果?! ∮捎谫Y料有限,因而上述內(nèi)容并不**,歡迎補充。
薄層色譜儀的適用
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù),屬固—液吸附色譜;
它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大;
因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。
此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應(yīng)及進行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;
涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時;
將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。
是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。
一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;
另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。
因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。
此外,在進行化學(xué)反應(yīng)時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。