【***** 維修保養(yǎng)】流式細(xì)胞儀是一種對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置，依據(jù)參數(shù)測(cè)量試驗(yàn)方法工作。流式細(xì)胞儀主要由流動(dòng)室和液流系統(tǒng)、激光源和光學(xué)系統(tǒng)、光電管和檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)4部分組成，目前在生物醫(yī)療領(lǐng)域有廣泛運(yùn)用，主要用于分析細(xì)胞表面標(biāo)志、分析細(xì)胞受體、分析腫瘤細(xì)胞的DNA、RNA含量、分析免疫細(xì)胞的功能。　　對(duì)于精密儀器而言，故障的出現(xiàn)在所難免，如何排查故障是延長(zhǎng)儀器壽命的關(guān)鍵。流式細(xì)胞儀常見(jiàn)的故障主要有儀器長(zhǎng)時(shí)間不能進(jìn)入ready狀態(tài)、噴嘴堵塞兩個(gè)?！　x器長(zhǎng)時(shí)間不能進(jìn)入ready狀態(tài)　　儀器長(zhǎng)時(shí)間不能進(jìn)入ready狀態(tài)可能是試管有裂縫導(dǎo)致漏氣、鞘液罐的接口漏氣、噴嘴上的膠圈破損及老化、電源部分有故障，應(yīng)遵循由簡(jiǎn)到難的順序逐一排查，替換問(wèn)題組件，如果仍然無(wú)法進(jìn)入ready狀態(tài)，需請(qǐng)廠家來(lái)維修?！　娮於氯　娮於氯话愠霈F(xiàn)在實(shí)機(jī)操作中。日常的噴嘴在prime機(jī)時(shí)噴出一道水柱，如果噴出的是氣泡，則說(shuō)明噴嘴有堵塞，氣泡越大堵塞越嚴(yán)重。排除故障的步驟：①放開(kāi)托臂，用10%的次氯酸鈉反復(fù)沖洗再放回托臂機(jī)，如果故障還未排除就應(yīng)關(guān)掉主機(jī)。②用的注射器接上膠管套，在噴嘴上反復(fù)抽吸，一般堵塞現(xiàn)象可以排除。③如果注射器抽吸無(wú)效，則要小自取下噴嘴。此操作應(yīng)由廠家的維修人員或熟練的工作人員進(jìn)行，以免撞彎了噴嘴。噴嘴用注射器套上沖洗，直至噴嘴噴出的水柱呈直線為止。④如果噴嘴堵塞經(jīng)上述淀查病后的水柱呈直線為止。④如果噴嘴堵塞經(jīng)上述3個(gè)步驟還不能解決，可以用超聲波儀清洗。清洗時(shí)噴嘴兩頭應(yīng)套上試管，以防碰彎。先將噴嘴浸入的10%次氯酸鈉中超聲1h，然后用過(guò)濾后H2O的再超聲1h，經(jīng)過(guò)此步驟清洗的噴嘴都會(huì)**堵塞現(xiàn)象。注意不到萬(wàn)不得己時(shí)不要拆下噴嘴清洗，因?yàn)榉磸?fù)的拆卸會(huì)增加噴嘴損壞的可能性。 流式細(xì)胞儀的十大應(yīng)用

　　1、DNA倍體分析　　DNA分析是流式細(xì)胞儀***初且是現(xiàn)在應(yīng)用***廣檢測(cè)項(xiàng)目。由于惡性細(xì)胞DNA含量通常與正常細(xì)胞不同，存在異倍體細(xì)胞，所以現(xiàn)有很研究評(píng)價(jià)異倍體細(xì)胞與腫瘤惡性度及其預(yù)后的關(guān)系。DNA含量檢測(cè)還可提供細(xì)胞周期方面的信息，這在細(xì)胞生物學(xué)中運(yùn)用很廣泛。特別地，它可表示出細(xì)胞毒性**對(duì)細(xì)胞作用過(guò)程。這些DNA檢測(cè)還可與細(xì)胞表面標(biāo)志物標(biāo)記同時(shí)進(jìn)行，這樣在細(xì)胞混合培養(yǎng)中，可通常追蹤表達(dá)特異標(biāo)志物的細(xì)胞顯示其生長(zhǎng)周期情況。所有方法都是基于染料能與核酸起特異的化學(xué)反應(yīng)并發(fā)射出熒光，常用的染料為PI，DAPI?！　≡谠擃I(lǐng)域Partec公司的 CyFlow PA是一枝獨(dú)秀?！　?、細(xì)胞生存能力實(shí)驗(yàn)　　使用Heochest 33342染料與DNA特異性結(jié)合，后因細(xì)胞活力不同染料的結(jié)合程度也各異，故可評(píng)估細(xì)胞的活性度?！　?、計(jì)數(shù)外周血中檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞　　使用TO染料能夠特異性地與RNA結(jié)合，結(jié)合系數(shù)高達(dá)3000，故具有很好的性價(jià)比。　　4、外周血、骨髓采集物中CD34陽(yáng)性干細(xì)胞計(jì)數(shù)，臨床上用于骨髓移植前干細(xì)胞數(shù)理的測(cè)定。使用標(biāo)準(zhǔn)ISHAG方案，需要DNA或其他核染料占用FITC通道，PE標(biāo)記CD34抗體，PE-CY5標(biāo)記CD45抗體?！　?、交叉淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)　　檢測(cè)識(shí)別供體血清中免疫球蛋白與受體粒細(xì)胞之間是否存在反應(yīng)有著重要臨床意義，因?yàn)檫@種反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致移植后發(fā)熱、移植后肺損傷及免疫性粒細(xì)胞缺乏癥。流式細(xì)胞儀可檢測(cè)全血樣本與血清孵育后粒細(xì)胞上結(jié)合的人免疫球蛋白。FITC標(biāo)記人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記粒細(xì)胞表面標(biāo)志物、PE-CY5標(biāo)記HLA抗體?！　?、血小板自身抗體檢測(cè)　　血小板自身抗體識(shí)別人血小板抗原，會(huì)引起各種臨床相關(guān)癥狀，如新生兒自免性血小板減少癥、輸血后紫癜、難治性血小板減少。流式細(xì)胞可快速準(zhǔn)確地檢測(cè)血小板自身抗體。FITC標(biāo)記抗人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記識(shí)別血小板抗體?！　?、移植交叉配型　　原細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)，主要用于避免移植物超急性排拆反應(yīng)。流式細(xì)胞儀用于監(jiān)測(cè)T或B細(xì)胞是否受到受體血清中免疫球蛋白攻擊，作為HLA配型前的預(yù)實(shí)驗(yàn)。流式細(xì)胞儀因其高**性已成為該領(lǐng)域內(nèi)的金標(biāo)準(zhǔn)。FITC標(biāo)記抗人免疫球蛋白抗體、PE標(biāo)記識(shí)別T細(xì)胞CD3或B細(xì)胞CD29抗體?！　?、檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)抗原或細(xì)胞有絲分裂刺激后活化效應(yīng)淋巴細(xì)胞早期活化指標(biāo)CD69可用來(lái)檢測(cè)免疫**效果。流式細(xì)胞使用三色分析可監(jiān)測(cè)淋巴細(xì)胞各亞群活化情況：FITC標(biāo)記的CD3抗體、PE標(biāo)記的CD8抗體、PE-CY5標(biāo)記的CD69抗體?！　?、細(xì)胞增殖狀態(tài)檢測(cè)　　核增殖抗PCNA、Ki67、BrdUrd用于衡量細(xì)胞增殖分裂狀況，在評(píng)估腫瘤預(yù)后有重要意義。為些標(biāo)志物的檢測(cè)一般同細(xì)胞表面標(biāo)志物同時(shí)檢測(cè)。FITC標(biāo)記PCNA或Ki67或BrdUrd，PE或（并）PE-CY5標(biāo)記細(xì)胞表面標(biāo)志物?！　?0、染色體分析　　流式細(xì)胞儀染色分析運(yùn)用兩種特異性染料：Hoechest33258與核苷酸AT結(jié)合；Chromomycin A3與GC相結(jié)合。從而在雙參數(shù)坐標(biāo)上根據(jù)染色體ATCG含量的不同識(shí)別各種染色體。平時(shí)進(jìn)行的染色體分析耗時(shí)且需要操作者**經(jīng)驗(yàn)，而用流式細(xì)胞儀時(shí)可快速地識(shí)別出異常染色體，如加配分選系統(tǒng)可將這些異常染色體分選出來(lái)作進(jìn)一步分析。