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流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室維護(hù)和保養(yǎng) 流式細(xì)胞儀使用方法

時(shí)間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點(diǎn)擊:

流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室維護(hù)和保養(yǎng) 流式細(xì)胞儀使用方法(圖1)

  流式細(xì)胞儀(Flow cytometer)是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái)。多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器,它只能測(cè)量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測(cè)出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說(shuō),它的細(xì)節(jié)分辨率為零?!   ×私馊绾握_地維護(hù)和保養(yǎng)流動(dòng)室,可zui大化延長(zhǎng)流動(dòng)室的性能和使用期限。而不正確的使用和維護(hù),則可能產(chǎn)生不正確的讀數(shù)和數(shù)據(jù),而且會(huì)使得你不停呼叫工程師甚至更換流動(dòng)室或光路?!   ∫弧⑿璞苊獾幕瘜W(xué)物質(zhì)    目前大部分流動(dòng)室都是由石英或熔融石英制作而成,故需避免pH值大于9.5的堿性溶液非常重要。這些溶液可能腐蝕石英,使其變毛糙,影響光學(xué)性能。一旦使用過(guò)堿性溶液,在流動(dòng)室的通路上可能會(huì)看到一些被腐蝕的條紋,如果這些條紋剛好位于激光器檢測(cè)點(diǎn),那么就可能影響檢測(cè)準(zhǔn)確性?!   《⑷绾伪苊饨Y(jié)晶    避免結(jié)晶很重要。為了避免流動(dòng)室內(nèi)液體結(jié)晶,需經(jīng)常用水沖洗。在跑完緩沖液或生理鹽水之后,尤其是高pH值的溶液后,**沖洗**必要。有些流動(dòng)室內(nèi)部會(huì)包被一些特殊材料,以防止**或結(jié)晶生長(zhǎng)。    三、清洗    清洗流動(dòng)室和光路連接器對(duì)于**流式細(xì)胞儀的正確運(yùn)行都**重要。其中zui重要的一點(diǎn)就是別讓流動(dòng)室的液體干掉,而含有鹽分、蛋白或其它固態(tài)溶解物的液體,均可能損傷液路?!   〉那鍧嵎绞骄褪怯贸錆M10%表面活性劑的針頭連接流動(dòng)室,將活性劑注入流動(dòng)室,多次注射后,將液體留在流動(dòng)室內(nèi)至少2小時(shí)。zui后關(guān)機(jī)前,流動(dòng)室必須**用蒸餾水充滿?!   ∪绻鲃?dòng)室只是過(guò)夜,第二天馬上就用,那么可以用buffer充?!   ∪绻^(guò)一個(gè)周末或長(zhǎng)時(shí)間不用,那么建議使用蒸餾水或20%乙醇充?!   ∷摹⒉僮骱褪褂弥械淖⒁馐马?xiàng)    1.光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強(qiáng)的光線下以后,需要較長(zhǎng)時(shí)間的“暗適應(yīng)”以**或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;    2.光源不得在短時(shí)間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;    3.液流系統(tǒng)必需隨時(shí)保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過(guò)過(guò)濾、**;    4.注意根據(jù)測(cè)量對(duì)象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;    5.特別強(qiáng)度每次測(cè)量都需要對(duì)照組。 流式細(xì)胞儀的發(fā)展歷史

  1、1934年,Moldavan使懸浮的紅細(xì)胞從一個(gè)毛細(xì)玻璃管中流過(guò),每個(gè)通過(guò)的細(xì)胞可被一個(gè)光電裝置記錄下來(lái)。這就是流式細(xì)胞儀的雛形?! ?、1965年,Kamentsky用紫外吸收和可見光散射兩個(gè)參數(shù)同時(shí)測(cè)量未染色細(xì)胞,給出細(xì)胞中核酸的含量和細(xì)胞大小。奠定了多參數(shù)流式細(xì)胞測(cè)量的基礎(chǔ)。  3、1967年,Van Dilla和Los Alamos采用了層流流動(dòng)室和氬激光器,開發(fā)出了液流束、照明光軸、檢測(cè)系統(tǒng)三者相互垂直的流式細(xì)胞儀。這成為目前各種流式細(xì)胞儀的基礎(chǔ)。  4、1969年,F(xiàn)ulwyler利用靜電墨水噴射液滴偏轉(zhuǎn)技術(shù),建立了流式細(xì)胞分選術(shù)。Ehrlich和Wheeless利用飛點(diǎn)掃描技術(shù)和縫掃描技術(shù)使零分辨率的流式細(xì)胞儀變成了低分辨率的流式細(xì)胞儀?! ?、20世紀(jì)70年代,隨著Kohler和Milstein成功提出了單克隆抗體技術(shù)和熒光標(biāo)記技術(shù),為特異研究和分析細(xì)胞奠定了良好的基礎(chǔ)?! ?、1973年,美國(guó)BD公司和美國(guó)斯坦福大學(xué)合作,研制開發(fā)并生產(chǎn)了世界上**臺(tái)商用流式細(xì)胞儀FACS I。  7、20世紀(jì)80年代,流式細(xì)胞儀的數(shù)據(jù)采集、存儲(chǔ)、顯示、分析日趨完善,隨著樣品制備方法的增加,新的熒光染料和細(xì)胞標(biāo)記物的出現(xiàn),使流式細(xì)胞儀的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大。  8、20世紀(jì)90年代,與之配套的標(biāo)本制備儀和自動(dòng)進(jìn)樣器的問(wèn)世,以及適合臨床應(yīng)用的單克隆抗體的增加,使流式細(xì)胞儀逐漸從科研單位進(jìn)入醫(yī)院的**實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)科,成為現(xiàn)代化的臨床檢驗(yàn)儀器的一部分。


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