LC-20A型液相色譜儀的日常操作與維護保養(yǎng)

公司地址：江西省南昌市解放西路明珠廣場C棟902室，福建省廈門市樂海北里35號403室

南昌捷島科儀專業(yè)生產(chǎn)銷售捷島牌GC1690系列，GC1620系列氣相色譜儀，并代理銷售、培訓(xùn)、維修上海伍豐、沃特世/Waters、安捷倫、島津、上海儀電上分廠、賽默飛世爾等**外知名品牌氣相色譜儀、液相色譜儀及其配件耗材，優(yōu)惠價格、培訓(xùn)、維修請銷售、培訓(xùn)和維修統(tǒng)一客服，：，歡迎經(jīng)銷商和終端用戶在線或與訂購，謝謝！

日常使用

>> 配置

系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由DGU-20A3脫氣機、2個LC-20AT溶劑輸送泵分為A，B泵、SIL-20A自動進樣器（7725手動進樣器）、C18填料色譜柱、CTO-20A柱溫箱、SPD-20A紫外-可見檢測器、CBM-20A系統(tǒng)控制器、LCSolution（Ver.1.21）工作站等組成。

>> 準(zhǔn)備

使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗方法準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾（有機相和水相分別選用各自的專用濾膜），超聲脫氣20min以上待用。根據(jù)待檢樣品的需要選用合適的色譜柱（柱進出口方向應(yīng)與流動相流向一致）和定量環(huán)。 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時配制），用合適的0.45μm的樣品過濾器過濾后待用。 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。注意：真空抽濾裝置和超聲波裝置為液相色譜實驗室必須的輔助設(shè)備。

>> 開機和平衡系統(tǒng)

接通電源，依次開啟穩(wěn)壓電源、A泵、B泵、柱溫箱、自動進樣器、檢測器、系統(tǒng)控制器，待泵和檢測器自檢結(jié)束后，打開電腦顯示器、主機，啟動工作站軟件。先把吸濾頭放入流動相瓶中，打開排液閥，按purge鍵排液2～3分鐘，purge完畢后關(guān)閉排液閥啟動泵送液（流速開始不宜太高應(yīng)為正常分析流速的50％～80％），如有柱溫條件可同時開啟柱溫箱，平衡系統(tǒng)30分鐘左右，此時可以同時進行自動進樣器的purge操作（時間為15～25分鐘）自動進樣器清洗液一般使用與流動相比例接近的不含緩沖鹽的試劑也可以用甲醇：水＝70：30或甲醇：水＝1：1代替，觀察檢測器基線平穩(wěn)后即可做樣。注意：1.如果使用前色譜柱中保存的流動相為純甲醇或純乙腈，而新流動相中含有緩沖鹽時，應(yīng)先用純水沖洗色譜柱**鐘左右再使用流動相，以免鹽析出損壞系統(tǒng)。2.如系統(tǒng)為正相和反相交換使用，應(yīng)先將所有管路用異丙醇清洗后再更換新流動相使用。

>> 清洗系統(tǒng)和關(guān)機

手動進樣閥清洗：數(shù)據(jù)采集完畢后，如使用的是手動進樣器請參看下圖清洗：

具體方法： 用注射器吸20ml超純水后套上沖洗頭，將清洗頭輕輕頂在進樣口上（不宜用力太大，否則容易損壞進樣口），使進樣閥保持在Inject位置，慢慢將水推入，水將通過注射針導(dǎo)入口、引導(dǎo)管、注射針導(dǎo)入管和注射針密封圈，由樣品溢出管排出。

泵頭手動清洗：

如系統(tǒng)中有泵頭自動清洗裝置，則無需手動清洗，否則需手動清洗尤其使用完緩沖鹽流動相時，清洗時使用下面工具，先用注射器吸入20毫升蒸餾水，套上針頭，插入泵頭清洗管任意一端，推入蒸餾水，另一端流入廢液杯，重復(fù)2～3次即可！

色譜柱清洗：

繼續(xù)以分析中使用流動相沖洗10分鐘以上，待基線平穩(wěn)后關(guān)閉檢測器，沖洗色譜柱如流動相不含緩沖鹽，可以用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）直接沖洗30分鐘以上后把流速設(shè)為零，然后關(guān)閉所有儀器設(shè)備，順序為：先退出工作站軟件，再依次關(guān)閉系統(tǒng)控制器、檢測器、自動進樣器、柱溫箱、泵；如流動相含緩沖鹽可先用純水沖洗20～30分鐘后再用甲醇：水＝70：30（或用純甲醇）沖洗30分鐘以上，流速設(shè)零后再關(guān)閉儀器各部分電源，然后關(guān)閉總電源離開實驗室。

日常使用中簡單故障的處理

當(dāng)LC泵不吸液或泵壓波動超過0.5Mpa時需要進行單向閥的清洗，清洗時需將單向閥有墊片的一面朝上，以防內(nèi)部零件散落。此處僅為LC-20AT的操作過程，其他類型的泵操作過程類似.取下連接管路取下進口單向閥處的流動相輸液管

取下進出口單向閥進行清洗（用甲醇或異丙醇超聲20min）

當(dāng)系統(tǒng)壓力偏高時，可能是由于在線過濾片的污染所造成，判斷時先斷開色譜柱入口，用1ml/min的流速送液，柱前壓力應(yīng)低于0.8Mpa,如果超過則需要對在線過濾片進行清洗或更換。以下流程僅為LC-20AT的操作過程。在線過濾片拆卸過程：1. 拆除連接管路 2. 取下在線過濾器

228-39082-91

3. 取下在線過濾片

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4. 安裝新的在線過濾片 在線過濾片的超聲清洗方法為：5%稀硝酸（30min）――水超聲清洗5分鐘――甲醇超聲清洗10min。注意：稀硝酸與甲醇不能混和，否則有可能會引起爆炸。當(dāng)LC泵頭漏液或輸液量超過限定值時需要進行密封圈的更換，此處僅為LC-20AT的操作過程，其他類型的泵操作過程類似。密封圈更換過程：1. 首先按功能鍵FUNC鍵到CONTROL然后按Enter鍵進入P-SET功能，輸入1，按Enter鍵，讓柱塞桿復(fù)位，泵送液指示燈自動熄滅后既復(fù)位完畢。2. 拆除相應(yīng)的管路

3. 拆除相應(yīng)的泵頭

4. 以專用工具取下舊的密封圈，并安裝新的密封圈

取密封圈時的注意事項：

1. 在拆除泵頭時應(yīng)交替均勻地擰下固定內(nèi)六角螺釘。

2. 取泵頭時應(yīng)雙手水平緩慢取下，防止折斷柱塞桿。

3. 密封圈需用專用工具進行更換，取密封圈的工具有正反方向，凸頭的一面是取舊密封圈的，光滑的一面是用來裝新密封圈的。

4. 新密封圈甲醇浸泡5分鐘后換上。

5. 泵頭和密封圈之間有個環(huán)形墊片，請勿遺失。

密封圈的種類及壽命

南昌捷島科儀專業(yè)生產(chǎn)銷售捷島牌GC1690系列，GC1620系列氣相色譜儀，并代理銷售、培訓(xùn)、維修上海伍豐、沃特世/Waters、安捷倫、島津、上海儀電上分廠、賽默飛世爾等**外知名品牌氣相色譜儀、液相色譜儀及其配件耗材，優(yōu)惠價格、培訓(xùn)、維修請銷售、培訓(xùn)和維修統(tǒng)一客服，：，歡迎經(jīng)銷商和終端用戶在線或與訂購，謝謝！

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**液相色譜在使用過程中常會出現(xiàn)一些影響分析結(jié)果的問題，如果使用人員了解常見問題及其成因和相關(guān)解決方法，就能做到早預(yù)防勤維護，使分析結(jié)果保持較好的穩(wěn)定性與較高的**性。

1.氣泡溢出

流動相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法**不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0~3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時即可。

2.色譜柱平衡

如果我們觀察到保留時間漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動相**平衡。通常平衡需要10~20個柱體積的流動相。但如果在流動相中加入少量添加劑則需要相當(dāng)長的時間來平衡色譜柱。需要柱子的充分平衡，然后才能對HPLC進行檢定。

3.柱壓高

⑴緩沖液鹽分如（乙酸銨等）沉積于柱內(nèi)；⑵樣品污染沉積。

處理對于**種情況先用40~50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，***后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

4.無指示

⑴泵密封墊圈磨損；⑵大量氣泡進入泵體。

處理對于**種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同時，用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

5.不穩(wěn)定

原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

6.峰分叉

⑴色譜柱被污染；⑵柱頭填料塌陷。

處理對于**種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子（沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定），再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，***后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分（污染的填料），裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

7.重復(fù)性差

⑴進樣閥漏液；⑵加樣針不到位；⑶液量不足。

處理對于**種情況更換進樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，注意不要讓空氣進入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，**樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，**溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。

8.基線漂移

一般說來，機器剛起動時，基線容易漂移，大概要半個小時的平衡時間，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，還有就是在低波長下（220 nm）平衡時間相對會比較長，但如果你在實驗過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移，則你要考慮下面的原因：

1）柱溫波動。解決方法：控制好柱子和流動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱；

2）流通池被污染或有氣體。 解決方法：用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池（***好斷開柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）；

3）紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈；

4）流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。

解決方法：檢查流動相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑；

5）樣品中有強保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。

解決方法：使用保護柱，如有必要，在進樣之間。在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子；

6）檢測器沒有設(shè)定在**吸收波長處。解決方法：將波長調(diào)整至**吸收波長處；

7）流動相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。解決方法：加適量的酸或堿調(diào)至***佳PH值。

**液相色譜儀系統(tǒng)組成：液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對于整個系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測器是核心部件同時也是易出問題的主要部位。