液相色譜儀是一種利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對(duì)混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器?，F(xiàn)代液相色譜儀一般由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成?？梢哉f(shuō)每個(gè)部分的品質(zhì)好壞都可能直接影響儀器的檢測(cè)結(jié)果?！　∫话銇?lái)說(shuō)，液相色譜儀使用后，應(yīng)該對(duì)檢測(cè)器進(jìn)行清洗。常規(guī)清洗不必拆下流通池，可直接在流通池入口處(即檢測(cè)器輸入端)，接上一個(gè)專用的注射器接頭，依次用去離子水、酒精和3MHNO3沖洗流通池，后用去離子水反復(fù)沖洗數(shù)次。檢測(cè)器出口用玻璃瓶盛接流出的廢液?！　〉绻麢z測(cè)器已長(zhǎng)期使用或受到高濃度樣品的污染，經(jīng)上述方法還不能除去污垢，就得取下流通池，按以下步驟拆開(kāi)進(jìn)行清洗：　　1.卸下紫外檢測(cè)器側(cè)面遮蓋流通池的蓋板，松開(kāi)固定流通池支架的螺釘，小心地取出流通池支架。　　2.拆下連接流通池輸入、輸出端的不銹鋼導(dǎo)管(或PEEK導(dǎo)管)，卸下流通池體。仔細(xì)擰下石英窗和透鏡的護(hù)圈。小心取下墊圈、石英窗、透鏡、護(hù)圈，放在一個(gè)盛有乙醇的燒杯內(nèi)，用超聲波清洗機(jī)處理5min~10min。　　3.用蒸餾水、乙醇沖洗流通池，并用超聲波清洗，后用去離子水沖洗數(shù)次，除去池內(nèi)雜物?！　?.烘干各部件(注意：避免用手直接接觸透鏡及石英窗)。　　5.重新裝配流通池體。　　6.按原樣裝在流通池支架上，并接好導(dǎo)管，并進(jìn)行試漏。(方法：池體輸入端與恒流泵連接，開(kāi)啟恒流泵(流動(dòng)相用蒸餾水)，視各密封點(diǎn)及石英窗口是否有漏液溢出。　　7.裝入紫外檢測(cè)器機(jī)箱內(nèi)，蓋上蓋板，并用原螺釘、螺帽固定?！　∽ⅲ荷鲜鲆合嗌V儀檢測(cè)器的保養(yǎng)拆洗應(yīng)有經(jīng)培訓(xùn)過(guò)的專業(yè)維修人員進(jìn)行。 **液相色譜儀操作步驟

　　**液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。與經(jīng)典的液相色譜相比，具有**液相所用的固定相粒度?。?um-10um）、傳質(zhì)快、柱效高的優(yōu)勢(shì)。近年來(lái)，在保健食品功效成分、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑、維生素類、蛋白質(zhì)的分離測(cè)定等應(yīng)用廣泛。世界上約有80％的有機(jī)化合物可以用HPLC來(lái)分析測(cè)定。

　　**液相色譜的分離過(guò)程HPLC，借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。

　　**液相色譜儀操作步驟：

　　1)過(guò)濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。

　　2)對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。

　　3)打開(kāi)HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀)，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測(cè)系統(tǒng)。

　　4)進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。

　　5)一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。

　　6)調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。

　　7)設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測(cè)器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b.基線歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。

　　8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。**樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。

　　9)關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。