Agilent液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序　　1.目的：建立一個液相色譜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?！　?.范圍：適用于Agilent液相的使用?！　?.責(zé)任：使用Agilent液相的化驗員。　　4.程序　　4.1工作環(huán)境　　實驗室溫度為20～27℃，溫度變化<3℃/hr，相對濕度<80%，液相色譜儀工作臺，長2米、寬0.8米、承重大于80公斤，離墻距離0.3米以上。單相交流220V，(+5%～10%)，50～60Hz，有單獨的良好接地。配置穩(wěn)壓電源，功率大于2.5千瓦?！　?.2使用前的準(zhǔn)備　　4.2.1二次蒸餾水，(建議用0.45微米水相濾膜過濾)；甲醇或乙晴(色譜純)，(建議用0.45微米有機相濾膜過濾)；其他樣品所需流動相，(都需經(jīng)過0.45微米濾膜過濾)。將上述溶劑放入超聲波池，除去氣泡，方可使用?！　?.2.2把流動相放入溶劑瓶中，打開purge閥，單擊pump圖標(biāo)，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊setup選項，進(jìn)入pump編輯畫面，設(shè)flow：5ml/min，單擊OK；單擊pump圖標(biāo)，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊pump control選項，選中ON，單擊OK，則系統(tǒng)開始purge，直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止，切換通道繼續(xù)purge，直到所有要用通道無氣泡為止；單擊pump圖標(biāo)，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊setup選項，進(jìn)入pump編輯畫面，設(shè)flow：1.0ml/min，關(guān)閉purge valve。單擊pump下的的瓶圖標(biāo)，輸入溶劑的實際體積和瓶體積，也可輸入阻止分析和關(guān)泵的體積，單擊OK。　　4.2.3進(jìn)行樣品前處理(稀釋或溶解至所需濃度)?！　?.3實驗步驟　　4.3.1準(zhǔn)備　　4.3.1.1開啟Agilent 1100LC各模塊電源。　　4.3.1.2打開計算機，雙擊online圖標(biāo)?！　?.3.1.3從"view"菜單中選擇"method and run control"畫面，單擊"view"菜單中的"show top toolbar","show status toolbar","system diagram","sampling diagram"使其命令前有"√"標(biāo)志?！　?.3.2數(shù)據(jù)采集方法編輯　　4.3.2.1從“method"菜單中選擇"edit entire method"項，選中除"data analysis"外的三項，單擊OK，進(jìn)入下一畫面?！　?.3.2.2在"method comments"中加入方法的信息(如This is for test!)，單擊OK進(jìn)入下一畫面?！　?.3.2.3泵參數(shù)設(shè)定　　在"flow"處輸入流量1ml/min，在"solvent"處輸入流動相中各溶劑所占的比例，也可"insert"一行"timetable",編輯梯度。在"pressure limits max"處輸入柱子的zui大耐高壓，以保護(hù)柱子，單擊OK進(jìn)入下一畫面?！　?.3.2.4柱溫箱參數(shù)設(shè)定　　在"temperature"下面的方框內(nèi)輸入所需的溫度，并選中它點擊"more>>"鍵，如圖所示，選中"same as left"使柱溫箱的溫度左右一致，點擊OK進(jìn)入下一畫面。　　4.3.2.5 VWD檢測器參數(shù)設(shè)定　　在"wavelength"下方的空白處輸入所需的檢測波長，在"peak width(response time)"下方點擊下拉式三角框，選擇合適的響應(yīng)時間，如>0.1min 。 在"timetable"中可以"insert"一行，可以輸入隨時間切換的波長。　　4.3.2.6在"run time checklist"中，選中"data acquisition"，單擊OK。　　4.3.2.7單擊“method"菜單，選中"save method as"，輸入一方法名，單擊OK。　　4.3.2.8從"run control"菜單中選擇"sample info"選項，輸入操作者姓名，在"data file"中選擇"manual"或"prefix"?！　?.3.2.9從"instrument"菜單中，選擇"system on"。　　4.3.2.10單擊OK，等儀器ready，基線平穩(wěn)，從"method"菜單中選擇"run method"，進(jìn)樣。　　4.3.2.11進(jìn)樣時，閥門位置處于"inject"位置，進(jìn)樣針取樣量應(yīng)為所規(guī)定體積的三倍，用濾紙拭凈針頭表面殘留液，進(jìn)樣時要輕而快，進(jìn)樣完畢應(yīng)快速將閥門搬至"load"位置，進(jìn)樣完畢，數(shù)分鐘后將進(jìn)樣針拔下，閥門回復(fù)到"inject"位置。 4.3.3數(shù)據(jù)分析方法編輯　　4.3.3.1從"view"菜單中，單擊"data analysis"進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面。　　4.3.3.2從"file"菜單中選擇"load signal"選項，選中您的數(shù)據(jù)文件，單擊OK。　　4.3.3.3做譜圖優(yōu)化，從"graphics"菜單中選擇"signal options"選項，從"ranges"中選擇"auto scale"及合適的顯示時間，單擊OK，或選擇"use ranges"調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行，直到圖的比例合適為止?！　?.3.3.4積分　　4.3.3.4.1從"integration"中選擇"auto integrate"，如積分結(jié)果不理想，再從菜單中選擇"integration events"選項，選擇合適的"slope sensitivity","peak width","area reject","height reject"?！　?.3.3.4.2從"integration"菜單中選擇"integrate"選項，則數(shù)據(jù)被積分?！　?.3.3.4.3如積分結(jié)果不理想，則重復(fù)上兩步動作，直到滿意為止。　　4.3.3.4.4單擊左邊"√"圖標(biāo)，將積分參數(shù)存入方法?！　?.3.3.5打印報告　　4.3.3.5.1從"report"菜單中選擇"specify report"選項，進(jìn)入?！　?.3.3.5.2單擊"quantitative results"框中"calculate"右側(cè)的黑三角，選擇所需的報告形式，其他選項不變，單擊OK?！　?.3.3.5.3從"report"菜單中選擇"print report"，則報告結(jié)果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則單擊"report"底部的"print"鈕。　　4.3.4關(guān)機　　4.3.4.1關(guān)機前，先用水和有機溶劑對系統(tǒng)進(jìn)行梯度沖洗，然后再用有機溶劑沖洗系統(tǒng)，然后關(guān)泵(適用于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]　　4.3.4.2退出化學(xué)工作站，及其他窗口?！　?.3.4.3關(guān)掉Agilent1100電源開關(guān)，計算機(用shut down關(guān))。　　4.4.1色譜柱長時間不用，存放時，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑，兩端封死?！　?.4.2對于手動進(jìn)樣器，當(dāng)使用緩沖液時，要用水沖洗進(jìn)樣口，同時搬動進(jìn)樣閥數(shù)次。　　4.4.3流動相使用前必須過濾、超聲，不能使用多日存放的純化水(易長菌)，應(yīng)每天更換純化水。 **液相色譜儀常用問題解決方法

　　在化學(xué)、工業(yè)行業(yè)中**液相色譜儀被廣泛使用，用戶在使用中偶爾也會出現(xiàn)一些問題，下面就一些常見液相色譜儀的故障問題為用戶進(jìn)行總結(jié)分析?！　?*、液相色譜儀中有氣體冒出　　如果液相色譜儀有氣泡流出，不管是通過關(guān)閉色譜儀泵或者是打開色譜儀下閥，都沒解決氣泡產(chǎn)生的問題，有可能是機器的過濾器長期的受到了腐蝕的影響，使霉菌等物質(zhì)阻塞了液相色譜儀?！　」收辖鉀Q辦法：一般情況下用超聲波來清洗5-10分鐘左右，或者是可以將過濾器浸泡在硝酸鈉溶液當(dāng)中輕微的搖晃，然后用清水進(jìn)行沖洗就可以了。進(jìn)行完上述操作后，如果色譜儀還是會有氣泡的話，只能證明過濾器內(nèi)部被腐蝕的非常嚴(yán)重，則要用色譜用甲醇在沖洗半個小時然后超聲波清洗半小時后用清水清理干凈泄壓閥關(guān)閉就可以　　第二、液相色譜儀出現(xiàn)無指示的故障　　色譜儀當(dāng)出現(xiàn)無指示的故障時，主要原因是泵的墊圈有了的磨損和大量的氣體進(jìn)入到了泵體當(dāng)中?！　」收辖鉀Q辦法：檢查是色譜儀墊圈出了問題，更換一個墊圈即可。如果是出現(xiàn)了第二種問題，在液相色譜泵的作用下在泵的出口處將空氣盡快的抽出。如果問題還是無法解決這個時候就可以，拆下色譜儀當(dāng)中的單向閥，進(jìn)行超聲波的清洗過程。