1.規(guī)程　　一、waters HPLC系 統(tǒng) 的 打 開 及 關 閉 順 序　　1.1打 開 順 序　　· 對 于 分 體 式 ： 請 按 泵 、 進 樣 器 、 柱 溫 箱 、 檢 測 器 的 順 序 打 開 開 關 ， 待 各 部 分 分別 顯 示 初 始 化 完 畢 后 ， zui 后 打 開 Millennium 32化 學 工 作 站 ?！　”?與 色 譜 工 作 站 的 連 接：對 于 510 泵，因 為 此 泵 與 色 譜 工 作 站 是 單 向 聯(lián) 系 ， 如 要 使 泵在 Remote 狀 態(tài) 下 由 工 作 站 控 制 ， 首 先 要 在 泵 的 鍵 盤 上 按 Menu 鍵 ， 待 顯 示 屏 切 換 至 Mode 狀態(tài) 下 ， 其 狀 態(tài) 是 Loca ，按 Edit/Enter 鍵 ，在 Local 的 L 前 有 閃 動 的 光 標 顯 示，按Ù 鍵， Local 轉 換成 Rem， 再 按 Edit/Enter 鍵，此 命 令 已 輸 入 進 去, zui 后 按 Stop/Run 鍵， 使 泵 處 于Run 狀 態(tài) 這 時 泵 和工 作 站 的 連 接 即 告 成 功。 泵 的 任 何 動 作 都 可 由 工 作 站 來 控 制。還 應 注 意 這 一 步 工 作 在 每次 開 機 時 都 要 進 行?！　?于 Alliance 2690 系 統(tǒng) ： 先 打 開 Alliance 2690 主 機 、 檢 測 器 電 源 開 關，待 初 始 化 完 畢 后 ，再進 入 Millennium 32 化 學 工 作 站?！　?.2關 閉 順 序　　首 先 退 出 Millennium 32化 學 工 作 站， 再 關 閉 系 統(tǒng) 的 其 他 部 分 。　　二、2Millennium 32化 學 工 作 站　　2.1Millennium 32化 學 工 作 站 的 進 入　　打 開 化 學 工 作 站 ， 系 統(tǒng) 自 動 進 入 Program Manager界 面 ， 雙 擊 Millennium 肖 像 ， 這 時 進入Millennium界 面 ， 雙 擊 Session Manager 圖 標 ， 系 統(tǒng) 將 自 動 初 始 化 ， 以 使 工 作 站 和 HPLC整 套系 統(tǒng) 進 行 聯(lián) 接 。 初 始 化 后 ， 按 系 統(tǒng) 要 求 鍵 入 你 的 User Name和 Password， 這 時 你 已 進 入 該系 統(tǒng) ?！　?.2Project的 進 入 和 建 立　　· Project的 進 入： 在 Session Manager窗 口 下 ， 擊 Project肖 像(或 從 View中 選 擇Projects), 在 其 中 有 已 建 好 的 Project， 雙 擊 你 所 需 的 Project肖 像 ， 再 進 行 你 想做 的 工 作 ?！　?middot; Project的 建 立　　從 File中 選 擇 New， 即 顯 示 New Project的 畫 面 ?！　≡?Project Name 中 輸 入 你 的 Project 名 稱 。　　在 Initiallze Project 項 目 中 選 擇 Copy 中 的 filter and fields 或 Methods。　　在 From Project 中 選 擇 要 拷 貝 的 現(xiàn) 存 Project。　　選 擇 Tablespace size?！　∵x OK， 存 貯 并 退 出 。　　當 Millennium 軟 件 在 建 立 一 個 新 的 Project 時 ， 在 屏 幕 上 及 時 顯 示 出 完 成 建 立 新 Project 的 百分 比 。 當 達 到 ** 時 ， 在 SessionManager 畫 面 即 出 現(xiàn) 一 個 新 的 Project 肖 像 ?！　?.3收 集 數(shù) 據(jù) 的 一 般 過 程　　使 用 Millennuium32收 集 數(shù) 據(jù) 的 一 般 過 程 如 下 ：在 Project 窗 口 內 建 立 收 集 數(shù) 據(jù) 所 需 儀 器 的儀 器 方 法； 建 立 包 括 此 儀 器 方 法 的 方 法 組 ； 使 用 此 方 法 組 收 集 數(shù) 據(jù) ?！　”?部 分 包 括 ： 建 立 儀 器 方 法 ， 建 立 方 法 組 ， 收 集 樣 品 。　　· 建 立 /修 改 儀 器 方 法　　從 Sessoin Manager窗 口 ， 打 開 所 需 的 Project?！　∵x 擇 Method 按 鈕 ， 現(xiàn) 存 的 方 法 的 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 屏 幕 上 ?！　?命 令 菜 單 中 選 擇 File， 然 后 選 擇 其 中 的 New Instrument Method， 即 出 現(xiàn) System Open 對 話 框 ?！　≡?目 錄 中 選 擇 收 集 數(shù) 據(jù) 需 要 使 用 的 色 譜 硬 件 系 統(tǒng) 的 名 稱 ， 如 ： System_1。 按 OK， 這 時Instrument Method 窗 口 即 顯 示 出 來 ?！　〈?口 的 上 部 分 是 該 系 統(tǒng) 的 所 有 儀 器 的 肖 像 。 用 鼠 標 器 將 需 要 設 定 儀 器 參 數(shù) 的 儀 器 部 件激 活 ， 然 后 在 儀 器 肖 像 上 雙 擊 兩 下 ， 即 出 現(xiàn) Instrument Dialog Box 畫 面 ?！　?各 個 部 件 設 置 操 作 條 件 ， 或 通 過 輸 入 新 的 參 數(shù) 來 更 改 以 前 的 參 數(shù) 。 例 如 ： 定 義 泵 參數(shù) ， 先 雙 擊 SIM/PCM 的 肖 像 。 填 寫 泵 參 數(shù) ， 按 OK?！　‘?所 有 參 數(shù) 設 置 完 成 后 ， 按 OK。 即 回 到 Instrument Method 窗 口 。 選 File 中 的 Save As 存 貯 儀 器方 法 文 件 ， 如 有 需 要 ， 起 一 文 件 名 ， 按 OK。　　選 擇 File 中 的 Exit， 即 回 到 Project 窗 口 。 新 的 儀 器 方 法 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 此 窗 口 下 。　　· 建 立 方 法 組 (Method Set)　　儀 器 方 法 編 好 后 ， 必 須 存 于 一 方 法 組 中 ， 才 能 在 Quick Set Control 中 調 用 。　　在 Project 窗 口 下 選 方 法 肖 像 。　　選 File 中 的 New Method Set， 即 顯 示 出 Method Set 對 話 框 ?！　≡?此 畫 面 的 Instrument Method 一 欄 ， 選 擇 已 確 定 的 儀 器 方 法 。 其 他 項 目 可 空 著 不 填 。 然 后選 File， Save As。 輸 入 方 法 組 名 后 ， 按 OK?！　∵x File， Exit。 即 退 回 到 Project 窗 口 。 新 設 置 的 方 法 組 肖 像 即 出 現(xiàn) 在 此 窗 口 下 ?！　?middot; 收 集 樣 品 ：完 成 以 上 各 步 驟 后 ， 即 可 收 集 樣 品 ?！　≡?Project 窗 口 下 選 擇 Quick Set Control 肖 像 。 出 現(xiàn) System Open 對 話 框 ?！　∵x 擇 建 立 儀 器 方 法 時 確 定 的 色 譜 硬 件 系 統(tǒng) ， 按 OK。 即 出 現(xiàn) Quick Set Control 窗 口 ?！　≡?此 窗 口 下 的 Sample Loading Table 中 用 鼠 標 器 按 第 一 行 ， 這 時 Millennium 軟 件 會 自 動 填 充 各項 初 始 參 數(shù) 。 通 過 輸 入 新 值 可 更 改 表 中 的 各 項 參 數(shù) ， 表 中 的 瓶 號(對 于 高 效 液 相 色 譜 儀的 進 樣 表 ，除 另 有 規(guī) 定 外 ， 按 括 號 法 安 排 進 樣 順 序 。 即 第 一 針 為 標 準 品 1作 為 系 統(tǒng) 適 用性 共 進 6針 ， 要 求 RSD不 大 于 2%， 隨 后 為 標 準 品 2， 進 樣 次 數(shù) 為 2針 ， 然 后 為 樣 品 1到 樣 品 3，各 進 2針 。 樣 品 3 后 為 標 準 品 1，依 次 類 推 ， 直 到 將 所 有 樣 品 都 安 排 在 進 樣 表 中 ) 進 樣 次數(shù) ， 進 樣 體 積 ， 運 行 時 間 等 項 目 對 自 動 進 樣 器 有 控 制 作 用 ?！　≡?Method Set Report 一 列 中 選 擇 在 前 面 剛 剛 建 立 的 方 法 組 ?！　≡?運 行 方 式 ( mode )中 選 Run Only?！　∵x 擇 進 樣 方 式： 菜 單mode 下 選 單 個 樣 品 或 樣 品 組 進 樣?！　?Sample Loading Table 中 第 一 行 點 黑 。 擊 Setup Instrument 按 鈕 ， 啟 動 系 統(tǒng) ?！　∠?統(tǒng) 啟 動 后 可 擊baseline monitor 圖 標， 即 可 觀 察 基 線 。　　待 基 線 平 穩(wěn) 后 ， 擊 綠 燈 或 樣 品 盤 肖 像 準 備 進 樣 。 出 現(xiàn) Injector wait 提 示 信 息 ， 隨 即 進樣?！　≡?樣 品 測 試 過 程 中， 系 統(tǒng) 會 在 Quick Set 窗 口 下 顯 示 瓶 號 和 進 樣 次 數(shù) 及 運 行 時 間 。 并 可在 此 窗 口 下 觀 察 檢 測 器 的 輸 出 情 況 。 屏 幕 上 顯 示 的 檢 測 器 輸 出 是 自 動 滿 量 程 方 式 (即 自動 按 zui 大 信 號 滿 格 輸 出 )。　　當 收 集 完 色 譜 數(shù) 據(jù) 后 ， 選 擇 File， Exit。 退 出 Quick Set 窗 口 。 樣 品 收 集 完 成 后 ，Millennuium32會 自 動 存 貯 收 集 的 數(shù) 據(jù) 。　　2.4建 立 數(shù) 據(jù) 處 理 的 方 法　　　　在 Millennuium32中 ， 完 成 不 同 的 任 務 需 編 輯 不 同 的 方 法 ， 如 儀 器 方 法 (收 集 數(shù) 據(jù) )， 處 理 方法 (定 性 定 量 分 析 )， 報 告 方 法 (打 印 實 驗 報 告 )等 ?！　”?部 分 包 括 ：　　*重 新 調 出 色 譜 峰 進 行 觀 察 ?！　?譜 圖 積 分 及 確 定 積 分 表 中 的 參 數(shù) 。　　*輸 入 組 分 表 資 料 。　　*存 貯 數(shù) 據(jù) 處 理 方 法 。　　· 調 閱 色 譜 圖　　進 入 在 其 中 收 集 樣 品 的 Project， 在 此 窗 口 下 選 Channel 肖 像 ?！　≡?Channel View Table 中 選 擇 欲 進 行 色 譜 分 析 的 文 件 行 并 使 其 變 黑?！　≡?Tools 下 選 擇 Review 肖 像 ， 這 時 在 Review Data窗 口 下 即 顯 示 出 你 調 入 的 色 譜 圖 ?！　∵x File， New Method。 在 New Method 對 話 框 中 指 定 數(shù) 據(jù) 處 理 的 類 型 ， 如 LC， 選 OK?！　?middot; 色 譜 圖 的 積 分　　選 View， Integration Table。 在 屏 幕 下 部 即 出 現(xiàn) Integration Event Table?！　≡?Peak Width， Minimum Area， Minimum Height 方 框 中 輸 入 適 宜 的 數(shù) 值 ?！　“?Integration 按 鈕 ， 觀 察 積 分 情 況 ， 并 適 當 進 行 積 分 參 數(shù) 的 調 整 。　　· 輸 入 組 分 資 料　　選 View， Component Table。 即 可 見 到 空 的 組 分 表 。　　選 Options， Fill Table From Result， 即 可 自 動 填 充 積 分 完 畢 的 色 譜 圖 的 組 分 表 。 也 可 用 手 動方 式 修 改 表 中 的 參 數(shù) ?！　“?Calibration/Quantitate 后 ， 選 View， Result Table。 即 可 看 到 積 分 的 結 果 。　　· 存 貯 數(shù) 據(jù) 處 理 方 法　　在Review Data 窗 口 下，選 File， Save Method。 在 Processing Method Save As 對 話 框 的 窗 口 下輸 入 數(shù) 據(jù)處 理 方 法 名 稱 。　　按 OK， 貯 存 Processing Method。 在 組 分 表 的 上 方 可 看 到 新 的 Processing Method 的 名 稱 ?！　∵x File， Exit。 即 可 退 出 Review Data 窗 口 ， 回 到 Project 窗 口 。　　2.5重 新 觀 察 色 譜 結 果　　　　· 進 入 你 所 需 的Project 窗 口 。 擊 Result View 肖 像 。　　· 在 Result View Table 中 選 擇 你 想 觀 察 的 色 譜 數(shù) 據(jù) 。　　· 擊 Review 肖 像 ， 你 所 選 擇 的 第 一 個 色 譜 數(shù) 據(jù) 的 譜 圖 將 在 Review Data 窗 口 下， 其 結 果 將 顯 示 在 Result Table 中 的 第 一 行 ?！　?middot; 按 Next Ch/Inj 的 方 框 即 可 看 到 下 一 針 進 樣 的 有 關 資 料 。　　· 選 File， Exit。 即 可 回 到 Project 窗 口 ?！　?.6報 告 方 法 的 編 輯 及 試 驗 報 告 的 打 印　　· 啟 動 報 告 出 版 系 統(tǒng)　　進 入“PROJECT” 窗 口?！　≡赩iews 下 按 一 下 方 法 肖 像?！　∵x 擇File，New Report Method。 這 時 即 可 編 輯 新 的 報 告 方 法?！　≡?報 告 排 版 窗 口 中， 右 邊 為 一 張 模 擬 的 白 紙， 左 上 方 的 列 表 為 排 版 時 可 放 置 在 右 邊 紙上 的 項 目。 如 圖 譜， 積 分 表， 樣 品 信 息， 儀 器 方 法 等， 左 下 方 為 報 告 頭 標 和 腳 標( 如土〕。 選 擇Individual 為 每 個 結 果 有 一 個 報 告， 選Summary of Result Sets All 方 式 為 打 一 個 集 中 的報 告。 按OK?！　?middot; 設 計 報 告 格 式　　按 一 下Chromatogram Groups 肖 像。 在 Chromatogram Groups 列 表 中 選 擇Auto-scaled Chromatogram 。 并 在 報告 頁 面 上 按 一 下， 用 鼠 標 器 將 此 圖 形 放 在 畫 面 合 適 的 位 置 上?！　∮?鼠 標 器 將 箭 頭 放 在 畫 面 的 邊 緣， 當 箭 頭 變 成 雙 箭 頭 時 將 圖 形 放 大 或 縮 小?！　∵x 擇Format，Landscape。 可 將 圖 譜 垂 直 放 置?！　“?一 下Method Group 肖 像， 從Method Group 的 列 表 中 選 擇Instrument Method， 并 在 報 告 頁 面 上 的 合 適處 按 一 下。 這 時 Instrument Method 方 框 將 出 現(xiàn) 在 報 告 頁 面 上?！　“?一 下Table Groups 肖 像， 在 Table Groups ， 并 在 報 告 格 式 上 的 合 適 位 置 上 按 一 下?！　∵x 擇Format，Page Size。 可 改 變 報 告 尺 寸 的 大 小?！　∵x 擇Customize，Header。 即 出 現(xiàn)Header 窗 口。 在 此 窗 口 下 選 擇General information 肖 像。在 General information Field 列 表 中 按 一 下Date。 這 時 在Field Name 的 方 框 中 即 出 現(xiàn)Date 方 框。 可 用 鼠 標 器 將此 方 框 移 動 到 合 適 的 位 置?！　】?用 文 字， 箭 頭， 方 框 等 工 具 在Header 窗 口 下 增 加 你 感 興 趣 的 內 容?！　∵xFile，Save。 輸 入 Header 的 名 稱 (如：My_Header〕， 按 OK， 返 回 到Header 窗 口。　　選File，Exit。 即 回 到Report Publisher 窗 口。　　在 Customize，F(xiàn)ooter。 即 出 現(xiàn) Footer 窗 口?！　“?一 下 General information 肖 像， 在General information Field 列 表 中 按 一 下Page Number 的 方 框。 將 此方 框 放 在 報 告 頁 面 的 注 腳 位 置 上。　　選File，Save。 輸 入Footer 的 名 稱 ( 如：My_ Footer )， 按OK， 返 回 到Footer 窗 口?！　∵xFile，Exit。 回 到Report Publish 窗 口。　　在Footer 列 表 中 選 剛 編 好 的 腳 標?！　?middot; 存 儲 報 告 方 法　　選File，Save。 輸 入 此 報 告 的 方 法 名 ( 如：My_ Report ) ， 按 OK， 返 回 到 Report Publisher 窗 口?！　∵xFile，Exit。 即 回 到PROJECT 窗 口。 在 此 窗 口 下 即 可 看 到 My_ Report 報 告 方 法 的 肖 像?！　?middot; 報 告 格 式 預 覽： 報 告 格 式 設 計 好 后， 在 打 印 之 前， 可 在 此 預 先 看 到 打 印 效果， 如 需 修 改 可 隨 時 切 換 到 報 告 出 版 窗 口， 邊 看 邊 修 改， 直 到 滿 意 為 止?！　≡赑ROJECT 窗 口 下， 選Result 肖 像， 即 出 現(xiàn)Result View Table 表。　　在 此 表 上 選 擇 需 要 報 告 的 結 果 文 件， 使 其 變 黑?！　“?一 下Preview 肖 像， 即 出 現(xiàn)Report Method Selection 窗 口?！　?目 錄 上 選 擇 剛 才 已 建 立 好 的 報 告 方 法， 按 OK。 這 時 即 出 現(xiàn) 剛 才 所 選 結 果 的 報 告。　　在 上 畫 面 上 按NextPage 或PrevPage 即 可 看 到 報 告 的 下 一 頁 或 上 一 頁。　　按 方 法 編 輯 肖 像 即 可 對 當 前 方 法 進 行 編 輯?！　“?打 印 肖 像， 即 可 將 此 報 告 打 印 出 來?！　∵x 擇File，Exit。 即 可 退 出 報 告 畫 面， 回 到“PROJECT” 窗 口。　　2.7批 量 進 樣 結 果 的 處 理 及 打 印 報 告　　　　· 當 已 有 確 定 的 處 理 方 法 后 ， 可 用 此 方 法 處 理 數(shù) 據(jù) ?！　≡?Channel View Table 表 中 選 擇 你 要 的 樣 品 行 并 將 其 按 黑 ?！　≡?Tools 下 擊Process and Report 肖 像 。 這 時 即 出 現(xiàn) Process and Report Options 對 話 框 。　　在 處 理 方 法 一 欄 中 選 擇 Use Specified Prosessing method 并 指 定 處 理 方 法 ， 把 Print 選 擇 框 的 叉扇 掉 。 按 OK。 這 時 開 始 處 理 你 所 選 的 數(shù) 據(jù) ， 在 屏 幕 下 方 顯 示 出 Result Generator 肖 像 ?！　“?Result View 肖 像 ， 處 理 后 的 數(shù) 據(jù) 即 出 現(xiàn) 在 Result View Table 中?！　?middot; 打 印 報 告　　在 Result View Table 表 中 選 擇 你 要 的結 果 行 并 將 其 按 黑 ?！　≡?Tools 下 按 一 下 打 印 機 肖 像 ， 這 時 出 現(xiàn) Background Report Generator 對 話 框 選 擇 你 所 要 用 的 報告 方 法 ， 按 OK。 色 譜 報 告 即 可 打 印 出 來 ?！　?.8使 用 后 應 填 寫 使 用 記 錄。 液相色譜填料的粒度選擇

　　現(xiàn)代**液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，首先必須對此有**的認識和了解。

　　液相色譜填料可以是陶瓷性質的無機物基質，也可以是有機聚合物基質。液相色譜填料中的有機物基質主要是硅膠和氧化鋁。無機物基質剛性大，在溶劑中不容易膨脹。

　　液相色譜填料中有機聚合物基質主要有交聯(lián)苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有機聚合物基質剛性小、易壓縮，溶劑或溶質容易滲入有機基質中，導致填料顆粒膨脹，結果減少傳質，***終使柱效降低。

　　液相色譜填料的粒度選擇

　　液相色譜填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3μm的填料應用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是**的因素。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%；然而，3μm的色譜柱的背壓卻是5μm的2倍。與此同時，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱，以縮短分析時間。另外，可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。