【***** 使用手冊】選擇一臺好的液相色譜儀對企業(yè)、實(shí)驗室的生產(chǎn)工作有很大的幫助，那么選擇一臺好的液相色譜儀該注意哪些因素呢？首先是看指標(biāo)，而液相色譜儀的指標(biāo)很多，有泵的、檢測器的、色譜柱等等；然后就是國家標(biāo)準(zhǔn)，儀器的主要指標(biāo)有噪音，漂移，zui小檢測濃度，定性定量重復(fù)性等，筆者將從這兩個方面一一為讀者朋友們分析。　　1、噪音　　噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度，噪音越大，檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好，否則噪音過大將會導(dǎo)致基線不穩(wěn)，甚至影響分析結(jié)果。　　2、漂移　　漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點(diǎn)的距離，通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定，從而在**程度上提高了分析效率?！　?、色譜柱　　色譜柱是液相色譜儀的心臟，通常要求柱效高、選擇性好，分析速度快等。目前市場上銷售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、氧化鋁、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米?！　?、進(jìn)樣器　　進(jìn)樣裝置要求：密封性好，重復(fù)性好，死體積小，保證**進(jìn)樣，進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。而且進(jìn)樣方式多種多樣，可分為隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動進(jìn)樣。自動進(jìn)樣器則是市場發(fā)展的趨勢?！　?、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)　　一般專業(yè)的液相色譜儀生產(chǎn)廠家都有自己配套的液相色譜儀控制軟件，但有不少液相色譜儀可以使用通用型的色譜數(shù)據(jù)工作站進(jìn)行數(shù)據(jù)計算處理，在數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)方面需根據(jù)自身資金來調(diào)整?！　?、操作簡便　　操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的，操作越簡單不僅用戶上手更快，也有利于提高分析效率，也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助?！　∧壳?*外都有著比較知名的液相色譜儀生產(chǎn)銷售企業(yè)，只要把握了以上幾點(diǎn)，并選擇較為知名的液相色譜儀生產(chǎn)銷售企業(yè)，相信讀者朋友們都能夠選購到心儀的液相色譜儀器。 反相**液相色譜柱的維護(hù)如何？

反相**液相色譜柱是基于溶質(zhì)、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應(yīng)建立的一種色譜模式，**一種有機(jī)分子的結(jié)構(gòu)中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高。

在**液相色譜中這是應(yīng)用面較廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色譜條件下，流動相多采用酸性的、低離子強(qiáng)度的水溶液，并加**比例的能與水互溶的異丙醇、乙腈或甲醇等有機(jī)改性劑，大量使用的填料為孔徑在30納米以上的硅膠烷基鍵合相，除此之外，也有少量高聚物微球。

反相**液相色譜柱的使用和維護(hù)

在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱。

(1)柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。

(2)如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。

(3)避免壓力和溫度的急劇變化及**機(jī)械震動。

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

(4)應(yīng)逐

漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)?*是水，反之亦然。

(5)如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫。

(6)一般說來反相**液相色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。

(7)選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

(8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

(9)經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，**保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。

(10)保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。**禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。

(11)反相**液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

(12)在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機(jī)，需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。

在日常分離分析工作中，反相**液相色譜柱的正確使用和維護(hù)**重要，色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。