【導(dǎo)讀】一．折射和折射率 光線在均勻的各向同性介質(zhì)中，兩點(diǎn)之間以直線傳播，當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí)，則發(fā)生折射現(xiàn)像，這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體

一．折射和折射率 光線在均勻的各向同性介質(zhì)中，兩點(diǎn)之間以直線傳播，當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí)，則發(fā)生折射現(xiàn)像，這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時(shí)，光線在其介面改變了方向，并和法線構(gòu)成折射角。

二．透鏡的性能 透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的***基本的光學(xué)元件，物鏡、目鏡及聚光鏡等部件均由單個(gè)和多個(gè)透鏡組成。依其外形的不同，可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負(fù)透鏡)兩大類。當(dāng)一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點(diǎn)，這個(gè)點(diǎn)稱“焦點(diǎn)”，通過交點(diǎn)并垂直光軸的平面，稱“焦平面”。焦點(diǎn)有兩個(gè)，在物方空間的焦點(diǎn)，稱“物方焦點(diǎn)”，該處的焦平面，稱“物方焦平面”；反之，在像方空間的焦點(diǎn)，稱“像方焦點(diǎn)”，該處的焦平面，稱“像方焦平面”。光線通過凹透鏡后，成正立虛像，而凸透鏡則成正立實(shí)像。實(shí)像可在屏幕上顯現(xiàn)出來，而虛像不能。 三．影響成像的關(guān)鍵因素—像差由于客觀條件，**光學(xué)系統(tǒng)都不能生成理論上理想的像，各種像差的存在影響了成像質(zhì)量。下面分別簡要介紹各種像差。 1．色差? 色差是透鏡成像的一個(gè)嚴(yán)重缺陷，發(fā)生在多色光為光源的情況下，單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍(lán) 紫 七種組成，各種光的波長不同 ，所以在通過透鏡時(shí)的折射率也不同，這樣物方一個(gè)點(diǎn)，在像方則可能形成一個(gè)色斑。光學(xué)系統(tǒng)***主要的功能就是消色差。 色差一般有位置色差，放大率色差。位置色差使像在**位置觀察都帶有色斑或暈環(huán)，使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣。 2．球差? 球差是軸上點(diǎn)的單色相差，是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結(jié)果是，一個(gè)點(diǎn)成像后，不在是個(gè)亮點(diǎn)，而是一個(gè)中間亮邊緣逐漸模糊的亮斑，從而影響成像質(zhì)量。 球差的矯正常利用透鏡組合來**，由于凸、凹透鏡的球差是相反的，可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予**。舊型號顯微鏡，物鏡的球差沒有**矯正，應(yīng)與相應(yīng)的補(bǔ)償目鏡配合，才能達(dá)到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差**由物鏡**。 3．慧差? 慧差屬軸外點(diǎn)的單色像差。軸外物點(diǎn)以大孔徑光束成像時(shí)，發(fā)出的光束通過透鏡后，不再相交一點(diǎn)，則一光點(diǎn)的像便會(huì)得到一逗點(diǎn)狀，型如慧星，故稱“慧差”。 4．像散? 像散也是影響清晰度的軸外點(diǎn)單色像差。當(dāng)視場很大時(shí)，邊緣上的物點(diǎn)離光軸遠(yuǎn)，光束傾斜大，經(jīng)透鏡后則引起像散。像散使原來的物點(diǎn)在成像后變成兩個(gè)分離并且相互垂直的短線，在理想像平面上綜合后，形成一個(gè)橢圓形的斑點(diǎn)。像散是通過復(fù)雜的透鏡組合來**。 5．場曲? 場曲又稱“像場彎曲”。當(dāng)透鏡存在場曲時(shí)，整個(gè)光束的交點(diǎn)不與理想像點(diǎn)重合，雖然在每個(gè)特定點(diǎn)都能得到清晰的像點(diǎn)，但整個(gè)像平面則是一個(gè)曲面。這樣在鏡檢時(shí)不能同時(shí)看清整個(gè)像面，給觀察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場物鏡，這種物鏡已經(jīng)矯正了場曲。 6．畸變? 前面所說各種像差除場曲外，都影響像的清晰度。畸變是另一種性質(zhì)的像差，光束的同心性不受到破壞。因此，不影響像的清晰度，但使像與原物體比，在形狀上造成失真。

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【導(dǎo)讀】a.在庫勒照明系統(tǒng)調(diào)整好的基礎(chǔ)上，用明視野方法把樣品調(diào)焦清晰； b.把聚光鏡轉(zhuǎn)到Ph1對準(zhǔn)轉(zhuǎn)盤刻度線位置，選用10×相差物鏡，換上待觀察的透明樣品； c.拔掉其中一個(gè)目鏡，換上對中望遠(yuǎn)鏡，并調(diào)焦

a.在庫勒照明系統(tǒng)調(diào)整好的基礎(chǔ)上，用明視野方法把樣品調(diào)焦清晰；

b.把聚光鏡轉(zhuǎn)到Ph1對準(zhǔn)轉(zhuǎn)盤刻度線位置，選用10×相差物鏡，換上待觀察的透明樣品；

c.拔掉其中一個(gè)目鏡，換上對中望遠(yuǎn)鏡，并調(diào)焦于視野中的兩個(gè)相差環(huán)上（物鏡的黑色相差環(huán)和聚光鏡的透光相差環(huán)）；

d.視野中的兩個(gè)相差環(huán)不**重合，調(diào)節(jié)聚光鏡上的兩個(gè)調(diào)節(jié)裝置（調(diào)整相差環(huán)左右位置的調(diào)節(jié)桿和調(diào)整前后位置的摩擦式轉(zhuǎn)鈕），使透光環(huán)作前后左右移動(dòng)而與黑環(huán)重合；

e.調(diào)整好后，換回觀察用目鏡，將綠色濾光片按入光路中，即可觀察到樣品的相差像；

f.有20×和40×物鏡觀察時(shí)，聚光鏡應(yīng)設(shè)在Ph2位置上，用100物鏡時(shí)，聚光鏡應(yīng)設(shè)在Ph3位置上。

適用范圍：適用于觀察透明、未染色或不能染色的樣品，如各種細(xì)胞、活組織、未染色或不染色的組織切片、水生生物等。

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目前，光學(xué)顯微鏡已由傳統(tǒng)的生物顯微鏡演變成諸多種類的專用顯微鏡，按照其成像試驗(yàn)方法可分為：　?、賻缀喂鈱W(xué)顯微鏡：包括生物顯微鏡、落射光顯微鏡、倒置顯微鏡、金相顯微鏡、暗視野顯　　微鏡等?！　、谖锢砉鈱W(xué)顯微鏡：包括相差顯微鏡、偏光顯微鏡、干涉顯微鏡、相差偏振光顯微鏡、相差　　干涉顯微鏡、相差熒光顯微鏡等。　?、坌畔⑥D(zhuǎn)換顯微鏡：包括熒光顯微鏡、顯微分光光度計(jì)、圖像分析顯微鏡、聲學(xué)顯微鏡、照　　相顯微鏡、電視顯微鏡等?！　×信e幾種顯微鏡的用途:　　a生物顯微鏡:一般來說顯微鏡可分大類為體視顯微鏡與生物顯微鏡。由于用途不同、要求不同，因而產(chǎn)生了許多分支，但基本試驗(yàn)方法還是一樣的。偏光、相襯、透射和落射等等還是歸屬于生物顯微鏡。　　b體視顯微鏡:又稱解剖顯微鏡、實(shí)體顯微鏡和立體顯微鏡，是用途比較多的顯微鏡。其操作簡便，對標(biāo)本要求不高，工作距離長，觀察時(shí)有較強(qiáng)的立體感，可以對實(shí)物進(jìn)行觀察，也可以在觀察的同時(shí)對標(biāo)本進(jìn)行一些操作。而不是像生物顯微鏡那樣需要對標(biāo)本進(jìn)行切片處理，切片需要相應(yīng)的技術(shù)和設(shè)備。因此，體視顯微鏡在微電子、精密儀器儀表裝配與維修、微雕等領(lǐng)域有很廣泛的應(yīng)用。在生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛用于解剖操作和顯微外科手術(shù)（目前已歸類為手術(shù)顯微鏡）,用于生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域其光源只能用冷光源（光纖）；在工業(yè)中用于微小零件和集成電路的觀測、裝配、檢查等工作?！　金相顯微鏡:很多人都喜歡寫成"金像顯微鏡"，金相顯微鏡是專門用于觀察金屬和礦物等不透明物體金相組織的顯微鏡。這些不透明物體無法在普通的透射顯微鏡中觀察，故相和普通顯微鏡的主要差別在于前者以反射光，而后者以透射光照明。在金相顯微鏡中照明光束從物鏡方向射到被觀察物體表，被物面反射后再返回物鏡成像。這種反射照明方式也廣泛用于集成電路硅片的檢測工作。