一般地說，根據(jù)樣品的性質(zhì)決定采用何種液相色譜方法，然后再選擇不同類型的柱。即不同類型的柱則代表了不同的色譜方法。

不同種類色譜柱的差異在于柱結(jié)構(gòu)、柱填料和柱尺寸的不同。

色譜柱有不同的尺寸(長度和內(nèi)徑)，分制備型、常規(guī)分析型和微型。不同類型柱的硬件也不同，(包括接頭、柱管等方面)，還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。

不同液相色譜法的尺寸根據(jù)需要可以選取，普通分析3～30cm長，內(nèi)徑4～8mm。常用20cm長、4.6mm內(nèi)徑的柱。制備型柱內(nèi)徑一般為8mm、25cm長。微型柱內(nèi)徑l～3mm，長10～20cm。不同的填料分析的效果可能不同，這是因為生產(chǎn)過程不同所致。同一廠商生產(chǎn)的同種填料因批號不同也會有差異，這種差異可能從基質(zhì)就開始(表面積、雜質(zhì)、特殊處理)，還有鍵合的化學物質(zhì)(一氯或三氯硅烷反應(yīng)劑)，不同廠家生產(chǎn)的填料還會因**技術(shù)(預(yù)處理、鍵合過程、填裝技術(shù))等不同而呈現(xiàn)較大差異。由于種種差異、僅能假設(shè)同一批號的柱有基本相同的性質(zhì)。

多數(shù)柱填料基質(zhì)采用多孔硅膠微粒，通常有球形和無定形兩種，具有不同的粒度、孔徑和表面積。多孔聚合物微粒也適用于反相色譜。聚合物柱的流動相范圍廣，流動相pH值可在1至13之間。而硅膠基質(zhì)pH僅能在2.5和7之間。顯然，聚合物柱要好一些，但目前仍是以硅膠基質(zhì)的柱為主。原則上，聚合物柱可以克服硅膠基質(zhì)柱的某些不足，但需要大量的實驗來證實，要進一步考查聚合物基質(zhì)填料的**優(yōu)越性。

在實際工作中，選擇性能良好的色譜柱可得到好的結(jié)果，首先要注意柱徑、長度、填料種類和填料粒度。

評價色譜柱的好壞不僅只是N數(shù)，還應(yīng)考慮組分在柱上的保留、鍵合相表面的物性、柱壓降以及峰不對稱因子As等。每一根新色譜柱都應(yīng)標出詳細參數(shù)，主要內(nèi)容包括公司名稱、柱名稱(商標)、柱填料、尺寸。附一張標準參考色譜圖，并標出色譜條件、樣品名稱、流動相組成、流速、柱溫、進樣體積、檢測器、峰的保留時間及峰名稱等。評價一根色譜柱的主要指標是：①塔板數(shù)N值；②峰不對稱因子As；③柱壓降；④鍵合相濃度。

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　　色譜柱的正確使用和維護**重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。

　　1.避免壓力和溫度的急劇變化及**機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩（如前所述）。

　　2.選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

　　3.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)?*是水，反之亦然。

　　4.一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。

　　5.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

　　6.經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，**保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。

　　7.色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗；另一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

　　8.保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。**禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。