想要色譜柱有更好的使用壽命 那就必須這樣做 色譜柱主要特點(diǎn)：高純度球形硅膠，高度統(tǒng)一的粒徑分布，高超的化學(xué)鍵合技術(shù)，端基封尾處理技術(shù)，嚴(yán)格的生氣工藝。 色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其較佳的性能和延長(zhǎng)使用壽命。正確的安裝請(qǐng)參考以下步驟： 步驟1.檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等檢查氣體過濾器和進(jìn)樣墊，保證輔助氣和檢測(cè)器的用氣暢通有效。如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。 步驟2.將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平 步驟3.將色譜柱連接于進(jìn)樣口上色譜柱在進(jìn)樣口中插入深度根據(jù)所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能zui大可能地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。通常來說，色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部，當(dāng)進(jìn)樣針穿過隔墊**插入進(jìn)樣口后如果針尖與色譜柱入口相差12cm，這就是較為理想的狀態(tài)。具體的插入程度和方法參見所使用GC的隨機(jī)手冊(cè)避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱，并小心不要讓標(biāo)記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)柱接觸摩擦，以防柱身斷裂受損。將色譜柱正確插入進(jìn)樣口后，用手把連接螺母擰上，擰緊后用手?jǐn)Q不動(dòng)了用扳手再多擰幾圈，保證安裝的密封程度。因?yàn)椴痪o密的安裝，不僅會(huì)引起裝置的泄漏，而且有可能對(duì)色譜柱造成損壞。 步驟4.接通載氣當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后，通載氣，將色譜柱的出口端插入裝有己烷的樣品瓶中，正常情況下，我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡，就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否正確設(shè)置，并檢查一下整個(gè)氣路有無泄漏。等所有問題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無溶劑殘留，再進(jìn)行下一步的安裝。 步驟5.將色譜柱連接于檢測(cè)器上其安裝和所需注意的事項(xiàng)與色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時(shí)，應(yīng)該將柱子與檢測(cè)器斷開，這樣檢測(cè)器可能會(huì)更快達(dá)到穩(wěn)定。 步驟6.確定載氣流量，再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查注意如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱，會(huì)快速且性的損壞色譜柱。 步驟7.色譜柱的老化安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后，就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化了。

在液相色譜的使用中，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)很多實(shí)驗(yàn)室會(huì)面臨色譜柱頻繁損壞的問題。所以，這次我們就來討論一下色譜柱的預(yù)防措施吧。

影響色譜柱使用的因素

1.流動(dòng)相pH

不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。其實(shí)，在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導(dǎo)致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。當(dāng)流動(dòng)相pH超出堿性范圍時(shí)，會(huì)加速硅膠的溶解而釋放出絮狀物堵塞柱子;當(dāng)流動(dòng)相pH值超出酸性范圍時(shí)，鍵合相易發(fā)生水解而流失，這兩種反應(yīng)均是不可逆反應(yīng)，特別是在溫度較高(>40℃)的環(huán)境下，會(huì)使柱效迅速降低而報(bào)廢。

而樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會(huì)有所改善，因?yàn)檩^低的PH系統(tǒng)會(huì)降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。

 

2.流動(dòng)相變質(zhì)

當(dāng)前使用為廣泛的是硅基鍵合相填料，當(dāng)以水溶液作為流動(dòng)相或流動(dòng)相中含有**濃度的磷酸鹽緩沖液時(shí)，水溶液中或緩沖鹽溶液中會(huì)滋生出一些**或霉菌，從而堵塞固定相顆粒間的空隙。特別是對(duì)于多元自動(dòng)比例混合的液相色譜儀來說,水相或緩沖鹽相獨(dú)立存貯，因存放時(shí)間較長(zhǎng)而容易發(fā)生此類問題。

3. 流動(dòng)相純度

目前，廣泛使用的填料顆粒粒徑范圍在3～10μm,孔徑在6～10nm,色譜柱在使用中會(huì)有大量的流動(dòng)相通過,如流動(dòng)相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒,則很容易在柱頭部位被截留,久而久之,造成色譜柱機(jī)械性堵塞,引起柱壓升高而無法正常使用。

4.其它因素

影響色譜柱壽命的因素很多，除流動(dòng)相和樣品因素外，還有其它一些外在因素，如，柱壓的影響，溫度的影響，色譜柱的正確沖洗，色譜柱的正確安裝等。

 

預(yù)防措施

 

為了降低色譜柱的損傷問題，大家在使用色譜柱時(shí)可以做一些預(yù)防。例如：

1在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器

在線過濾器的內(nèi)部顆?？障兑话闶?.5微米，對(duì)于UHPLC會(huì)選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。

所以，在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過濾篩板的堵塞。

 

2在柱子前端使用保護(hù)柱

保護(hù)柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。

因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料，所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。

 

3對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理

有一些液相的分析方法沒有明確標(biāo)注樣品的凈化，但希望大家在做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對(duì)樣品進(jìn)行過濾。

 

 

色譜柱損壞的簡(jiǎn)單**方法

 

由于化學(xué)損壞多發(fā)于色譜柱的前端，因此把色譜柱的前端修整或切割掉1/2-1 米通?？梢?*所有色譜方面的故障。在更為嚴(yán)重的情況下，可能需要切割掉5 米或更長(zhǎng)的一段。使用保護(hù)柱或保留間隙柱會(huì)將對(duì)色譜柱的損壞降至小，但是，需要經(jīng)常修整保護(hù)柱。酸或堿常常會(huì)破壞熔融石英管線的脫活表面，從而引起活性化合物的峰形變壞。

保存

     實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，色譜柱的合理保存也是保護(hù)色譜柱的關(guān)鍵，同時(shí)也是影響色譜柱使用壽命的關(guān)鍵。

1、短期保存

     應(yīng)保存在接近常用的流動(dòng)相條件下，并且移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。

2、長(zhǎng)期保存

     將色譜柱按照說明書保存在對(duì)應(yīng)的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中去下，兩頭用堵頭密封。

1.安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。 2.填充柱有卡套密封和墊片密封，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時(shí)不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片。 3.色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測(cè)器中。 4. 毛細(xì)管色譜柱 安裝插入的長(zhǎng)度要根據(jù)儀器的說明書而定，不同的色譜汽化室結(jié)構(gòu)不同，所以插進(jìn)的長(zhǎng)度也不同。需要說明的如果你用 毛細(xì)管色譜柱 采用不分流，汽化室采用填充柱接口這時(shí)與汽化室連接毛細(xì)管不能探進(jìn)太多，略超出卡套即可。氫氣和空氣的比例對(duì)FID檢測(cè)器的影響氫氣和空氣的比例應(yīng)1：10，當(dāng)氫氣比例過大時(shí)FID檢測(cè)器的靈敏度急劇下降，在使用色譜時(shí)別的條件不變的情況下，靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有一種氣體不足點(diǎn)火時(shí)發(fā)出“砰”的一聲，隨后就滅火，一般當(dāng)你點(diǎn)火電著就滅，再點(diǎn)還著隨后又滅是氫氣量不足。