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阿司匹林高效液相色譜法 液相色譜工作原理

時間:2022-12-23 09:30:05 作者:河北航信儀器 點擊:

阿司匹林栓-阿司匹林-**液相色譜法
應(yīng)用范圍: 本方法采用**液相色譜法測定阿司匹林栓中阿司匹林的含量。

本方法適用于阿司匹林栓。
 
方法試驗方法: 供試品在40~50℃水浴上微溫熔融,在不斷攪拌下冷卻至室溫,精密稱取適量,置50mL量瓶中,精密加內(nèi)標(biāo)溶液與乙醇適量,在40~50℃水浴中充分振搖使供試品溶解,用乙醇稀釋至刻度,置冰浴中冷卻1小時,取出迅速濾過,精密量取續(xù)濾液用乙醇稀釋,進(jìn)入**液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長280nm處檢測阿司匹林的峰面積,計算出其含量。
 
試劑: 1. 乙醇

2. 甲醇

3. 0.1%二乙胺水溶液

4. 冰醋酸
 
儀器設(shè)備: 1. 儀器

1.1 **液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論板數(shù)按阿司匹林峰計算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:甲醇 0.1%二乙胺水溶液 冰醋酸=40 60 4,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.3~3.4

2.2 檢測波長:280nm

阿司匹林**液相色譜法 液相色譜工作原理(圖1)

2.3 柱溫:室溫
 
試樣制備: 1. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取咖啡因,加乙醇制成每1mL中含4mg的溶液,即得內(nèi)標(biāo)溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取阿司匹林對照品約0.15g,置50mL量瓶中,精密加內(nèi)標(biāo)溶液5mL,用乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取2mL,置50mL量瓶中,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品5粒,精密稱定,置小燒杯中,在40~50℃水浴上微溫熔融,在不斷攪拌下冷卻至室溫,精密稱取適量(約相當(dāng)于阿司匹林0.15g),置50mL量瓶中,精密加內(nèi)標(biāo)溶液5mL與乙醇適量,在40~50℃水浴中充分振搖使供試品溶解,用乙醇稀釋至刻度,置冰浴中冷卻1小時,取出迅速濾過,精密量取續(xù)濾液2mL,置50mL量瓶中,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
 
操作步驟: 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL,注入**液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長280nm處測定阿司匹林(C9H8O4)的峰面積,計算出其含量。
 
參考文獻(xiàn): 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,二部,p.286。

**液相色譜儀常用脫氣方法

  **液相色譜儀(HPLC)現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣,在食品分析中,無論是殘留分析還是成分分析,HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù),首先你要保養(yǎng)好它,使它處于一個良好的待機(jī)狀態(tài),這樣你操作它進(jìn)行分析時就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果?! ×鲃酉嗝摎鈱τ诒苊釮PLC系統(tǒng)出問題,順利得到一個理想的數(shù)據(jù)是一個很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時要產(chǎn)生很大的壓力,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當(dāng)氣泡存在時,你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個氣泡足夠大,液相泵將不能輸送**溶劑,而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限,泵將停止工作。有些泵設(shè)計可以很好地排除氣泡,而也有一些泵設(shè)計當(dāng)氣泡存在時將停止運(yùn)轉(zhuǎn)?! 〕S玫拿摎夥椒ㄓ腥缦聨追N:  1、吹氦脫氣法。  利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60 mL/min流速通入流動相儲液容器中10~15min,可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。采用一個**分布式噴射流裝置,一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎**氣體排除。這意味著1L氦氣通過1L流動相就可完成排氣這個工作。這種脫氣方法雖然好,但我們**氦氣價格較高,很少有實驗室采用此方法?! ?、加熱回流法。  此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率,否則溶劑會丟失,混合流動相的比例會有變化?! ?、抽真空脫氣法?! 〈朔墒褂谜婵毡?,降壓至0.05~0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發(fā)生變化,從而影響到實驗的重現(xiàn)性,因此多用于單溶劑體系的簡單分析?! ?、超聲波脫氣法?! ⒂摎獾牧鲃酉嘀糜诔暡ㄇ逑雌髦校贸暡ㄕ鹗?0~20min。此法的脫氣效果***差。  5、在線脫氣法?! ‖F(xiàn)在商品的HPLC儀器,均可配在線脫氣機(jī)。在線脫氣使用簡單,低故障,有效。建議購買儀器時**要購買,有的公司是作為選購件,所以與儀器公司談配置時應(yīng)與公司確認(rèn)。

標(biāo)簽: **液相色譜儀 **液相色譜儀 **液相色譜儀常用脫氣方法_**液相色譜儀



    液相色譜柱是實驗室一種常用的色譜配件,也是液相色譜儀的必不可缺的一部分,那么,我們在做樣品分析的時候,如果色譜柱出現(xiàn)柱子柱流失怎么辦呢?下面為大家講講。
    首先明白液相色譜柱柱流失是不可避免的。柱流失程度與什么因素有關(guān)?
    1、柱流失程度與固定相種類和色譜柱規(guī)格有關(guān),一般固定相的量越多,柱流失則相對較高。
    2、柱流失與柱溫以及載氣中氧氣的濃度有關(guān)。高溫下,固定相的分解會加快,因此,高溫時的流失會比低溫時高。氧氣是許多固定相分解的催化劑,特別是在高溫時段,強(qiáng)調(diào)載氣的純度和液相色譜柱安裝的氣密性,一方面就是出于氧氣會加劇柱流失的考慮。
    3、此外,液相色譜柱隨著使用次數(shù)和時間的增加,固定相的穩(wěn)定性***終也會發(fā)生不可逆的變化,導(dǎo)致柱流失的增加。液相色譜柱柱流失嚴(yán)重情況多出現(xiàn)在進(jìn)樣的溶液類型,5MS的柱子是非極性的,當(dāng)使用極性溶劑時,就會發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致大量柱流失,在做測試時**要留意樣品的性質(zhì)。








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