吸附的主要原因　　反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會發(fā)生下列吸附現(xiàn)象：　　(1) 殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附；(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附；　　(3) 疏水性極強的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象，會引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生　　清洗方法　　1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進行清洗。 考慮樣品成分對于有機溶劑的溶解性，選用比淋洗液濃度高的有機溶劑、或選用極性較低的有機溶劑進行過柱清洗。這種情況下，有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象?！　?、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進行過柱清洗。　　*一般來說，清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可?！　≡诟轿煞制湮搅O強時，即使進行過清洗，柱性能也有可能得　　不到恢復(fù)。另外，請充分考慮淋洗液的pH值，以避免損壞色譜柱。 液相色譜柱的結(jié)構(gòu)說明

　　液相色譜柱的結(jié)構(gòu)：

　　1、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。

　　柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu)，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(**外已規(guī)范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積，在安裝色譜柱時，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底，然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴(yán)格控制在2．5mm長或其他固定尺寸)。

　　在兩端柱接頭內(nèi)，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng))，用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失?？罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì)，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有**的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕。

　　2、柱填料：

　　液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。

　　正相柱：多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種，其顆粒直徑在3—10?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。

　　反相柱：主要是以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分。

　　常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4、C2、苯基等，其顆粒粒徑在3—10?m之間。