安捷倫液相色譜儀HPLC的日常維護及保養(yǎng)　　1、手動進樣器：　　平時應該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進樣分析狀態(tài)清洗；如果出現漏液現象，原因極可能為轉子密封墊磨損或污染，一般要申請維修或更換配件?！　?、排液閥：　　此處不能**密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈?！　?、單向閥：　　如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取，則可能是單向閥出現問題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗！　　4、工作站：　　出現死機可重起計算機；不正常運行時，首先可更換電腦測試其硬件故障；或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件?！　?、過濾器：安捷倫液相色譜儀　　當色譜峰出現異常情況時，有可能是此部件被污染， 拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片?！　?、吸濾頭：　　特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗；清洗不成功則需要更換。　　7、流動相的抽作要求：　　液相級色譜醇，二次蒸餾水，緩沖鹽**要過濾；　　流動相脫氣至關重要(可采用抽濾，超聲波脫氣等方法)　　8、流通池：　　在色譜峰不正常時會可能是此部件補污染?？刹鹦逗笕〕銎渲械膲|片用異丙醇超洗(可根據說明書進行操作或申請維修)。　　9、泵頭：　　泵頭漏液或出現其它故障一般要申請維修(如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等)　　泵壓不穩(wěn)：　　1、泵頭有氣泡——流動相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動動相　　2、單向閥故障——清洗　　若上述操作仍不能解決，可用異丙醇沖洗流動(無色譜柱沖洗，由手動進樣器直接進檢測器)，流量為3-4ml/min，沖洗50分鐘左右，然后重新安裝色譜柱，更換流動相平衡，如此再不能解決泵壓波動故障，可申請更換配件?！　?0.漏液處理：　　C18柱不能進蛋白樣品、血樣，生物樣品?！　∫⒁庵拥腜H值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。　　長時間不用儀器，應該將柱子取上用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如甲醇)保存，因為純水易長霉。　　流路堵塞問題：堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查，并清洗。清洗方法：①以民丙醇作溶劑沖洗②放在異丙醇中超聲波清洗③用10%稀硝酸清洗　　11.緩沖鹽的使用：　　流動相含有鹽分時，做完實驗后**要進行流路沖洗；　　首先用水沖洗，打開排液閥用PURG鍵轉換出原有含鹽的流動相，然后關閉排液閥打開泵沖洗**流路45分鐘以上，如此更換流動相為水和甲醇混合液沖洗**流路30分鐘(此步驟一般可省去，根據實驗而論)，zui后更換純甲醇沖洗**流路45分鐘以上?！　?2.泵頭沖洗；安捷倫液相色譜儀　　用備件中的針頭和針管分別用蒸餾水和純甲醇沖洗3-5ml?！　∪缌鲃酉嗖缓}，可對機器定期進行簡單的沖洗維護，根據實驗多少而定?！　∈謩舆M樣器沖洗；　　同樣用備件中的針管和專用沖洗針頭對手動進樣器的裝載狀態(tài)和進樣狀態(tài)分別進行沖洗3-4ml的蒸餾水，然后再沖洗3-4ml的純甲醇。確保每次做完實驗，所有流路中充滿純甲醇！ 這樣操作能夠延長液相色譜柱使用壽命

　　液相色譜柱都是按照嚴格的標準生產和測試的，如能按照以下信息使用和維護色譜柱，不但能得到更佳的檢測結果，更能夠延長色譜柱的使用壽命。

　　色譜柱的安裝：

　　1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線，同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前，確認流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。

　　2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達***佳的連接效果，應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭，如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱，建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況，避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。

　　3、使用PEEK材料的通用接頭，只需用手擰緊不需要特定扳手，使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過100℃。

　　流動相平衡：

　　1、在進行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相**要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免**產生。

　　2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,**流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉淀。不應使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱，以免柱性能損壞（添加5％的有機溶劑沖洗色譜柱，同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡）。

　　3、流動相需脫氣后使用，可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別，應該使用過度分布的形式進行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。

　　樣品制備與操作：

　　1、樣品應當盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。

　　2、樣品溶液在進樣前應使用針頭式過濾器對樣品預先過濾。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效。

　　3、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得***佳分離效果，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外***高操作溫度不要超過60℃。

　　保存色譜柱：

　　1、如果流動相含有酸或無機鹽，應當先用去離子水（20倍柱體積）沖洗干凈。然后用用100％乙腈或甲醇保存色譜柱。***后用柱子的接頭密封，并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放。

　　2、應避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低。

　　色譜柱的再生：

　　1、用相當于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子，建議按柱子的箭頭方向沖洗，盡可能不反沖：沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇、甲醇。