通用型反相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要留意: 液相色譜柱柱性能可能由于所使用的樣品、活動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
樣品的前處理:
a、使用活動(dòng)相溶解樣品。
b、使用予處理柱除往樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c、使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除往微粒雜質(zhì)。
通用型反相色譜柱的保養(yǎng)
通用型反相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。在對(duì)色譜柱使用前進(jìn)行測(cè)試以后,要根據(jù)不同的情況對(duì)色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):
?、偻ㄓ眯头聪嗌V柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。
注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
?、陂L(zhǎng)期保存色譜柱:如色譜柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以?xún)?chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以?xún)?chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以?xún)?chǔ)存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購(gòu)買(mǎi)新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度是室溫。
色譜柱種類(lèi)介紹色譜柱是色譜儀器中重要組成部分之一,它是分離不可缺少的一部分。因此不同的樣品分類(lèi),用到不同的色譜柱。
色譜柱可簡(jiǎn)單分為以下幾類(lèi):
a、根據(jù)分離方式分為:
(1)正相色譜柱:SIL--磷脂、NH--糖、維生素E,CN--甾類(lèi)**。
(2)反相色譜柱:ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。
(3)離子交換色譜柱等。
b、根據(jù)所有的擔(dān)體材料分為三種:
(1)硅膠型:機(jī)械強(qiáng)度高,易制成小顆粒,理論塔板數(shù)高。
(2)聚合物型:在廣泛的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定。
(3)羥基磷灰石型:對(duì)蛋白質(zhì)等生物高分子樣品有特殊的選擇性。