【***** 使用手冊】凝膠色譜法又被稱為凝膠色譜技術(shù)，是一種效果好并且操作簡單的分離分析技術(shù)。SRT色譜柱在分析分離操作時，并不需要有機溶劑，所以一般對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。SRT凝膠色譜柱現(xiàn)今廣泛應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離和檢測，而該款色譜柱的制作工藝采用可控的化學(xué)修飾技術(shù)，因此可以確保色譜柱與色譜柱之間有著可靠的重現(xiàn)性，并且SRT色譜柱設(shè)計的大孔體積可保證高的分離容量以及優(yōu)異的分辨率?！　∫韵卤闶橇_列的SRT凝膠色譜柱的一些特點：　　1.高柱容量、高分辨率　　SRT凝膠色譜柱其精心設(shè)計的大孔體積可保證高的分離容量以及優(yōu)異的分辨率?！　?.pH范圍寬 (pH范圍2-8.5)　　SRT凝膠色譜柱的pH范圍讓其能夠幫助分析分離各類物質(zhì)?！　?.使用壽命長　　SRT凝膠色譜柱本身的SRT SEC鍵合固定相采用的是表面修飾技術(shù)，通過在高純度具有良好機械穩(wěn)定性的硅膠基質(zhì)上，鍵合一層均勻的納米厚度中性親水薄膜而制備成的，因而有較長的使用壽命?！　?.低鹽濃度洗脫，適合LC-MS分析　　LC-MS分析技術(shù)能夠以非常高的靈敏度同時測量多種復(fù)雜分析物。同時成功的LC-M分析具有高度靈敏度，具有可追溯性強和數(shù)據(jù)可靠的特性。因而低鹽濃度洗脫對分析效率來講有很大的幫助　　5.較低的非特異性吸附,對于生物樣品無強吸附，較高的蛋白回收率及活性回收率　　SRT凝膠色譜柱的填料采用化學(xué)鍵合技術(shù)，表面親水涂層覆蓋，因此SRT凝膠色譜柱在使用時不僅具有較好的穩(wěn)定性，而且對蛋白等生物樣品的非特異性吸附作用也非常小?！　?.解決多維色譜分析應(yīng)用　　SRT凝膠色譜柱可以解決多維色譜分析應(yīng)用在實際操作中的問題?！　RT凝膠色譜柱在使用時也有些操作需要注意，不然會影響到SRT凝膠色譜柱的使用效果。以下是SRT凝膠色譜柱的使用注意事項：　　1.預(yù)先測量　　在SRT凝膠色譜柱安置好了之后，測量就開始了。所以在操作SRT凝膠色譜柱時，在安置好后，應(yīng)避免溶液的進樣或者過快的壓力增長，這些情況可能會導(dǎo)致SRT凝膠色譜柱柱效下降?！　?.防止流速的波動　　SRT凝膠色譜柱很容易受到流速波動的影響，所以需要使用沒有壓力波動的泵，如果使用有壓力波動的泵，那么就需要在泵的出口處連接一個脈沖節(jié)氣門以防波動，并且節(jié)氣門應(yīng)非常耐受腐蝕。 影響色譜柱性能因素

　　色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。

　　一、物理因素：

　　(1)硅膠純度：硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。

　　(2)色譜柱尺寸填料床的長度和內(nèi)徑，增加色譜柱長度，可以在**程度上提高柱效，但也會升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會增加橫向擴散，同樣會導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴散，但壓力較大，對系統(tǒng)要求較高。

　　(3)顆粒形狀及粒徑球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻，不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動相線速度不均勻，容易譜帶展寬；平均顆粒直徑，粒徑越小，柱效越高，柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低，壓力越大。

　　(4)顆粒表面積：顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/g表示，相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力，更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài)，更適合梯度洗脫程序。

　　(5)孔徑：顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍是80~300?，大孔徑的填料顆?？梢匝娱L大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間，改善分離，所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。

　　二、化學(xué)因素：

　　(1)鍵合類型及鍵合相：鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合，這種鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率，縮短柱平衡時間；聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連，這種鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性，增加載樣量。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為。

　　(2)碳覆蓋率：高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性，但分析時間長。

　　(3)封端：硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基，如圖封端可以減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)，改善保留和峰行，這對于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術(shù)也會直接影響色譜柱的效能。