液相色譜儀色譜柱壓升高原因 液相色譜使用方法
時(shí)間:2023-01-12 09:30:02 作者:河北航信儀器 點(diǎn)擊:
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)于液相色譜儀來說,保持色譜柱的柱效、容量及滲透性,對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性有著比較重要的意義。而色譜柱的柱效受到內(nèi)外多種因素影響,色譜柱壓升高就是其中之一。柱壓升高的原因可能是因?yàn)橹矁?nèi)存在雜質(zhì),導(dǎo)致流動(dòng)項(xiàng)阻力增加?! ∵@次就來講一下,色譜柱壓升高的原因?! ?.樣品的沉淀 當(dāng)溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入色譜柱,有時(shí)可能因溶解度降低而沉淀出來,使色柱中產(chǎn)生樣品沉淀,造成流體阻力增加,引起柱壓升高。 2. 晶體的析出 使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí),緩沖液中的無機(jī)鹽可能會(huì)殘留在部件內(nèi)。它們會(huì)因在新流動(dòng)相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力升高?! ?. 流動(dòng)相的前處理 流動(dòng)相過濾不**或?yàn)檫M(jìn)行過濾,將雜質(zhì)等固體物滯留到濾板上,引起雜質(zhì)堵塞色譜柱濾片,引起柱壓升高?! ?. 溶質(zhì)吸附 當(dāng)溶質(zhì)在柱子上有較強(qiáng)的吸附,且所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),累積的未洗脫溶質(zhì)也會(huì)造成阻力增大和壓力升高。 5. 流動(dòng)相更換過度較快 當(dāng)改變流動(dòng)相體系時(shí),不**的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相存在于同一個(gè)體系之中,也會(huì)造成壓力升高?! ?. **或霉菌孳生 未能做到磷酸鹽緩沖液現(xiàn)配現(xiàn)用,導(dǎo)致霉菌在流動(dòng)相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長堵塞濾板,導(dǎo)致壓力升高。 7. 壓力脈沖 運(yùn)行過程中,有時(shí)會(huì)產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會(huì)造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化,填料微屑的長期積累也可能會(huì)使柱床阻力增大,造成壓力升高。 液相色譜儀是一種精密的色譜儀器,它在協(xié)助使用者進(jìn)行分析研究的同時(shí),也需要使用者的細(xì)心呵護(hù)。對(duì)于每一種儀器,使用者都應(yīng)該警惕使用時(shí)的不當(dāng)操作,這樣不但可以獲得更加的檢測(cè)數(shù)據(jù),還可以有效保護(hù)儀器,延長儀器壽命。
液相色譜儀與氣相色譜儀的3點(diǎn)區(qū)別
1、分析對(duì)象的區(qū)別 GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品;但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè)占有機(jī)物的20% HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機(jī)介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,對(duì)分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測(cè)用途廣泛,占有機(jī)物的80% 2、流動(dòng)相差別的區(qū)別 GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無親合作用力,只與固定相有相互作用?! PLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對(duì)分離起正向作用。且流動(dòng)相種類較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用,當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性?! ?、操作條件區(qū)別 GC:加溫操作 HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬小)