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反相液相色譜柱使用緩沖液需要注意哪些 液相色譜使用方法

時(shí)間:2023-01-04 09:30:02 作者:河北航信儀器 點(diǎn)擊:

【導(dǎo)讀】反相液相色譜柱采用高純和高機(jī)械強(qiáng)度的硅膠,采用先進(jìn)的鍵合技術(shù)制備而成, 色譜柱表面鍵合率高,覆蓋**,對(duì)堿性和酸性化合物具有良好的峰形。色譜柱柱容量高,

反相液相色譜柱采用高純和高機(jī)械強(qiáng)度的硅膠,采用先進(jìn)的鍵合技術(shù)制備而成, 色譜柱表面鍵合率高,覆蓋**,對(duì)堿性和酸性化合物具有良好的峰形。色譜柱柱容量高,壽命長(zhǎng),是一款具有較****的色譜柱。

反相液相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點(diǎn):

a、避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用;

b、緩沖液***好要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象;

c、使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍,做到胸中有數(shù);

d、清洗液路和柱子時(shí),有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;

e、長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞;

反相液相色譜柱使用緩沖液需要注意哪些 液相色譜使用方法(圖1)

f、選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩;

過渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,但是不含緩沖鹽的溶液。

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**液相色譜儀常見故障解決方法

  **液相色譜儀是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、查看器、記錄儀等幾有些構(gòu)成。儲(chǔ)液器中的活動(dòng)相被高壓泵打入體系,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入活動(dòng)相,被活動(dòng)相載入色譜柱(固定相、內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不一樣的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過重復(fù)屢次的吸附-解吸的分配進(jìn)程,各組分在移動(dòng)速度上發(fā)生較大的不一樣,被別離成單個(gè)組分順次從柱內(nèi)流出,經(jīng)過查看器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜方式打印出來。

  **液相色譜儀常見故障解決方法:

  故障1

  活動(dòng)相內(nèi)有氣泡,封閉泵,翻開泄壓閥,翻開purge鍵,清潔脫氣,氣泡不斷從過濾器冒出,進(jìn)入活動(dòng)相,不管翻開purge鍵幾回,都無法**不斷發(fā)生的氣泡。

  因素過濾器長(zhǎng)時(shí)刻沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi),過濾器內(nèi)部由于霉菌的成長(zhǎng)繁衍,構(gòu)成菌團(tuán),阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地經(jīng)過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入活動(dòng)相。

  處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清潔幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時(shí),悄悄震蕩幾回,再將過濾器用純水清潔幾回,翻開泄壓閥,翻開purge鍵,清潔脫氣,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,持續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,闡明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸損壞,活動(dòng)相能夠流暢地經(jīng)過過濾器。翻開泄壓閥,翻開泵,流速調(diào)至1.0~3.0ml/min,純水沖刷過濾器1小時(shí)擺布。即可將過濾器清潔潔凈。封閉泄壓閥,純甲醇沖刷半小時(shí)即可。

  故障2

  柱壓高因素:緩沖液鹽分如(乙酸銨等)堆積于柱內(nèi);樣品污染堆積。

  處理關(guān)于**種狀況先用40~50℃的純水,低速正向沖刷柱子,待柱壓逐步降低后,相應(yīng)進(jìn)步流速?zèng)_刷,柱壓大幅度降低后,用常溫純水沖刷,之后用純甲醇沖刷柱子30分鐘;關(guān)于第二種狀況,由樣品的堆積導(dǎo)致污染的C18柱,和純水反向沖刷柱子,然后換成甲醇沖刷,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖刷柱子(沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定),再用換成甲醇沖刷,然后用純水沖刷,***終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。

  故障3

  既無壓力指示,又無液體流過[1>;。

  泵密封墊圈磨損;很多氣泡進(jìn)入泵體。

  處理關(guān)于**種狀況,替換密封墊圈;關(guān)于第二種狀況,在泵作用的一起,用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處協(xié)助抽出空氣。

  故障4

  壓力動(dòng)搖大,流量不穩(wěn)定.

  因素體系中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。

  處理作業(yè)中留意調(diào)查活動(dòng)相的量,確保不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底,防止吸入空氣,活動(dòng)相要充沛脫氣[2>;。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清潔.

  故障5

  出峰欠安,峰分叉。

  因素色譜柱被污染;柱頭填料陷落。

  處理關(guān)于**種狀況,先用純水反向沖刷柱子,然后換成甲醇沖刷,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖刷柱子(沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定),再換成甲醇沖刷,然后用純水沖刷,***終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。如沖刷后仍然出峰欠安,則考慮第二種狀況。關(guān)于第二種狀況,擰開柱頭,查看柱填料是不是硬結(jié)或陷落。去掉硬結(jié)有些(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內(nèi)徑一樣的頂端滑潤(rùn)的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊重復(fù)幾回,直至裝滿填平;。柱頭用甲醇沖刷潔凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖刷30分鐘以上。


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