超聲波細胞破碎儀又名超聲微波協(xié)同萃取儀，超聲波細胞裂解儀，超聲波納米材料粉碎機。超聲波細胞破碎儀由超聲波發(fā)生器和換能器兩大部分組成（有的配置有隔音箱）。具有破碎組織、**、病毒、孢子及其它細胞結構，勻質、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取，加速反應等功能，故廣泛應用于生物、醫(yī)學、化學、制藥、食品、化妝品、環(huán)保等實驗室研究及企業(yè)生產。

　　日常維護

　　1、溫度保護設置點必須比室溫或樣品溫度高5℃以上。當發(fā)生溫度保護時可按SET健4秒以上，重新設置保護值。設錯溫度時也可按SET鍵4秒以上復位。

　　2、嚴禁在變幅桿未插入液體內(空載)時開機，否則會損壞換能器或超聲波發(fā)生器。

　　3、對各種細胞破碎量的多少，時間長短，功率大小，有待用戶根據各種不同細胞再摸索確定。此儀器輸出功率較大，如選用Ф2、Ф3或Ф6變幅桿時，應把功率開得小些，以免變幅桿過載而斷裂。

　　4、用**時間后變幅桿末端會被空化腐蝕而毛，可用油石或銼刀銼平，否則會影響工作效果。

　　5、變幅桿選擇開關是用來匹配不同規(guī)格的變幅桿與發(fā)生器的頻率，阻抗的一致性。如換能器組件的頻率與發(fā)生器的阻抗不一致時，超聲波就不能工作。

　　6、不需預熱，使用應有良好的接地。

　　7、在超聲破碎時，由于超聲波在液體中起空化效應，使液體溫度會很快升高，用戶對各種細胞的溫度要多加注意。建議采用短時間(每次不超過5秒)的多次破碎，同時可外加冰浴冷卻。

　　8、超聲波細胞破碎儀采用無工頻變壓器的開關電源，在打開發(fā)生器機殼后切勿亂摸，以防觸電。本儀器性能可靠，一般不易損壞。　　9、超聲波細胞破碎儀應安放在干燥，無潮濕、無陽光直射、無腐蝕性氣體的地方工作。

　　10、短時間的多次工作，工作時間1-2秒，間隙時間1-2秒，比連續(xù)長時間工作的效果要好。為防止液體發(fā)熱，可設定較長的間隙時間。

　　日常保養(yǎng)：用完后用酒精擦洗探頭或用清水進行超聲！

　　維護保養(yǎng)規(guī)程

　　1如果探頭必須與固體樣品接觸，請使用切成70毫米長的20毫米直徑不銹鋼管。不要用玻璃管

　　2微端頭只能與液接觸，不得與其它物體接觸

　　3在每次使用前，把探頭端頭放在水或者酒精中并且通電源數(shù)秒以去除殘余物

　　4探頭可以用高壓蒸鍋**，也可以浸入開水中**，也可以用****劑**

　　5不得把錐形微端頭用在連接器上。沒有連接器不要用直端頭。在處理低表面張力液體時不得使用帶螺紋端和可更換的端頭的探頭

**工程菌胞內表達主要分為兩種形式，一種是在強啟動子條件下的**表達，由于蛋白的過度表達;

使蛋白不能及時有效折疊而發(fā)生無規(guī)則卷曲，以固體顆粒的形式堆積于胞間質中，這就是所說的包涵體;

另外一種是間質內的可溶性表達，即可以發(fā)生正常折疊，具有生物活性。

一般情況下，**只要被正常破壁就可以通過離心的形式將包涵體和可溶性表達的蛋白分離開。

超聲破碎的條件一般是300w，10s/10s，20分鐘，具體條件可根據自身情況而定。

超聲前菌體的準備：菌液離心后，先用PBS將菌沉淀洗2-3遍;

然后按原菌液體積的1/5-1/10加入裂解液重懸菌體，裂解液的成分：

50mMTris-HCl,pH8.0,2mMEDTA，100mMNaCl，加溶菌酶至100ug/ml，0.1%TritonX-100。切記冰浴超聲！

如何判斷是否超聲**，根據經驗，一般有以下幾個方面：

1，外觀判斷：超聲前菌懸液是渾濁的，超聲**后變的透明、清澈。

2，液體的粘性：超聲后菌液從槍頭滴下不粘連。

3，高速離心：有用高速離心檢測超聲破碎程度的（一般用6,000g10min,比一般離心收集菌體的轉速高一點）。沉淀是未破碎或破碎不**的菌體。

4，染色：破碎后的菌液涂片，革蘭氏結晶紫溶液染色0.5分鐘，鏡檢。

（超聲后加入核酸酶**核酸對蛋白的污染）

一些需要注意的問題：

1，蛋白以包涵體形式表達，追求的是高破碎率，要求細胞碎片很小;

而另一種蛋白是可溶形式表達，所以細胞碎片不能很小，兩種情況要求不同但目的相同，都是便于后期的固液分離。

2，如果超聲時出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率太強。

3，超聲時間太長、功率太高對蛋白活性肯定有影響。

4，盡量防止泡沫的產生。