凝膠色譜法又名分子排阻色譜法，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作便捷、對(duì)高分子物質(zhì)分離能力強(qiáng)等特點(diǎn)。而凝膠色譜是液相色譜中的一種，一般是按照被分析混合物不同組分分子大小的不同對(duì)混合物進(jìn)行分離的，多用于高聚物的分析。主要用于生物化學(xué)、生物工程、醫(yī)療制藥等領(lǐng)域凝膠色譜法研究使用，是一種常見的精密儀器。而凝膠色譜儀究竟是如何運(yùn)作的？它的工作試驗(yàn)方法又是什么呢？　　在分析凝膠色譜儀的工作試驗(yàn)方法之前要先提一下流動(dòng)相和固定相的概念。在凝膠色譜法中，以液體為流動(dòng)相，以多孔固體作為固定相，而這個(gè)固定相的多空固定的孔是有**尺寸限制的，并且大小不一。在凝膠色譜儀運(yùn)作時(shí)，有一重要部分便是在這流動(dòng)相與固定相之間進(jìn)行的?！　?duì)凝膠色譜儀的工作試驗(yàn)方法說明，通過對(duì)凝膠色譜儀的結(jié)構(gòu)來梳理凝膠色譜儀的工作試驗(yàn)方法較為清晰。凝膠色譜儀是由溶劑貯存器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)記錄系統(tǒng)以及一血蝠屬的電子儀器設(shè)備組合而成的。凝膠色譜儀的工作流程是這樣的，輸液泵將溶液貯存器中的流動(dòng)相抽出，經(jīng)過進(jìn)樣器送入色譜柱之中，再從檢測(cè)記錄系統(tǒng)的出口流出，這時(shí)整個(gè)系統(tǒng)就被流動(dòng)相充滿。當(dāng)想要分離樣品從進(jìn)樣器的進(jìn)入時(shí)，流經(jīng)進(jìn)樣器的流動(dòng)相將其帶入到色譜柱中進(jìn)行分離，然后再分離后再依次以不同組進(jìn)入到檢測(cè)器中，記錄儀將進(jìn)入檢測(cè)器的信號(hào)記錄下來從而得到液相色譜圖。它的分離過程是在裝有多孔固定相的色譜柱中進(jìn)行的。當(dāng)尺寸大小不同的分子通過色譜柱時(shí)，可占據(jù)的窨體積也是不同的，對(duì)流動(dòng)相分子而言，填料孔的尺寸大得多，因此，流動(dòng)相可以自由擴(kuò)散出入；而大小不同的樣品分子則要滲透到不同的孔中，較大的分子只能進(jìn)入較大的孔中，較小的分子不僅能進(jìn)入大孔、中孔，還能進(jìn)入較小的孔。因此，相對(duì)比較小的分子在色譜柱里需要流經(jīng)的路程和時(shí)間比相對(duì)比較大的分子久得多，這樣一來高聚物分子在通過色譜柱的時(shí)候，較大的分子先被淋出，而較小的分子被后淋出來，這樣高聚物分子便按照分子大小分開來了，然后通過檢測(cè)器對(duì)其分別進(jìn)行測(cè)量就可以獲得這個(gè)樣品的組分信息了。　　上述便是一般凝膠色譜儀在其運(yùn)作時(shí)的工作試驗(yàn)方法了。凝膠色譜技術(shù)在當(dāng)下比較廣泛的應(yīng)用于高聚物的分析上，在對(duì)高分子材料、糖類、脂肪烴類的分離分析，尤其是聚合物生產(chǎn)及使用過程的監(jiān)測(cè)中起著重要的作用，對(duì)相關(guān)行業(yè)從業(yè)者有重要作用。 **液相色譜儀常用脫氣方法

　　**液相色譜儀（HPLC）現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣，在食品分析中，無論是殘留分析還是成分分析，HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣，你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù)，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài)，這樣你操作它進(jìn)行分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果?！　×鲃?dòng)相脫氣對(duì)于避免HPLC系統(tǒng)出問題，順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的壓力，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當(dāng)氣泡存在時(shí)，你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個(gè)氣泡足夠大，液相泵將不能輸送**溶劑，而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限，泵將停止工作。有些泵設(shè)計(jì)可以很好地排除氣泡，而也有一些泵設(shè)計(jì)當(dāng)氣泡存在時(shí)將停止運(yùn)轉(zhuǎn)?！　〕Ｓ玫拿摎夥椒ㄓ腥缦聨追N：　　1、吹氦脫氣法?！　±煤庠谝后w中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60 mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。采用一個(gè)**分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎**氣體排除。這意味著1L氦氣通過1L流動(dòng)相就可完成排氣這個(gè)工作。這種脫氣方法雖然好，但我們**氦氣價(jià)格較高，很少有實(shí)驗(yàn)室采用此方法。　　2、加熱回流法?！　〈朔ǖ拿摎庑Ч^好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化?！　?、抽真空脫氣法?！　〈朔墒褂谜婵毡茫祲褐?.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析?！　?、超聲波脫氣法?！　⒂摎獾牧鲃?dòng)相置于超聲波清洗器中，用超聲波震蕩10～20min。此法的脫氣效果***差。　　5、在線脫氣法。　　現(xiàn)在商品的HPLC儀器，均可配在線脫氣機(jī)。在線脫氣使用簡(jiǎn)單，低故障，有效。建議購買儀器時(shí)**要購買，有的公司是作為選購件，所以與儀器公司談配置時(shí)應(yīng)與公司確認(rèn)。