二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（95%），來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。　　　　二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法　　　　1. 將隨機提供的減壓閥裝在二氧化碳鋼瓶上，接頭處不得有漏氣現(xiàn)象，暫不打開鋼瓶。將減壓閥輸出接頭用膠管（可用血壓計上用的外徑φ8，內(nèi)徑φ4的橡膠管代用）與CO2 箱背后上方的CO2 進氣管接頭接通相連，用壓緊圈壓緊，以防漏氣?！　　　?. 用酒精將CO2 箱工作室內(nèi)擦凈，在箱體后背打開紫外線燈電源開關(guān)，**1-2小時。　　　　3. 用加水管連接水龍頭和箱體左上側(cè)加水口。水套式CO2 箱依此操作！　　　　4. 接通電源，電源開關(guān)置“1”，綠色指示燈亮?！　　　. 水套式CO2 箱必須先進行加水操作，步驟如下所述：　　　　打開水龍頭，緩慢給水箱加水，隨水位逐漸升高，當?shù)退恢甘緹魷绾?，此時再等待3-5秒后停止加水，此時水位在低、高水位之間，水位燈均應不亮，設備可投入運行。在未加水至高于低水位時，低水位指示燈亮并有蜂鳴報警聲。如進水過多，高水位指示燈亮后，水將從箱體背后溢水口溢出，故當高水位指示燈亮時，把左下側(cè)的放水口橡皮管拉出后拔出放水塞放水（注意：放水橡皮管應向外拉直約300mm左右）。直至高水位指示燈滅后2-3秒，再把放水塞頭塞緊。低水位報警時，應及時加水，否則溫度控制器停止加熱?！　　　. 將溫度設定值調(diào)到需要的溫度（例如37℃），加熱指示燈（綠）應亮，表示正在加熱。（注：環(huán)境溫度超出25℃，可用空調(diào)降低環(huán)境溫度。）　　　　c. 將二氧化碳控制開關(guān)置于“0”。（關(guān)閉電磁閥，因為在未通二氧化碳培養(yǎng)時電磁閥長時間通電會發(fā)熱，影響電磁閥壽命。）　　　　d. 待溫度達到設定值后。將二氧化碳鋼瓶開啟，（開啟前，減壓閥應盡量擰松，防止減壓閥輸出壓力過高導致輸氣橡皮管暴裂?。p壓閥上進氣壓力表指示鋼瓶內(nèi)二氧化碳壓力，緩慢地順時針擰減壓閥旋扭。使減壓閥輸出壓力指示為0.05Mpa，指針處于刻度線中間。此時用撥盤設定二氧化碳濃度（出廠時調(diào)整為5%），開啟二氧化碳控制開關(guān)前要關(guān)閉空氣流量計和二氧化碳流量計，二氧化碳控制器顯示“1”，此時即有二氧化碳進入內(nèi)室。隨著濃度升高，二氧化碳控制器顯示出二氧化碳濃度值，到設定值時，設備自動切換到空氣及二氧化碳補氣狀態(tài)。此時需調(diào)整空氣流量計浮子應指示在760 ml/min（出廠時已調(diào)好），二氧化碳流量計浮子應指示在40 ml/min（出廠時已調(diào)好）；若浮子偏離上述數(shù)值時，可調(diào)節(jié)流量計旋鈕到760 ml/min（空氣）及40 ml/min（二氧化碳）準確為止。（在開、關(guān)箱門后，短時間內(nèi)空氣流量計無流量，CO2 流量計流量也小于40ml/min這是正?，F(xiàn)象）　　　　e. 出廠時一般調(diào)整為5%±0.3%二氧化碳濃度，已能滿足廣大用戶的要求。　　　　f. 當溫度達到設定值，波動±0.5℃以內(nèi)，二氧化碳濃度也達到要求后，即可進行細胞培養(yǎng)。放入水盤，使?jié)穸确弦??！　　　. 在使用本機或長期不用后使用本機，均應按上述要求操作，并且在正式培養(yǎng)前應作箱內(nèi)污染檢查?！　　　?. 關(guān)機　　　　培養(yǎng)結(jié)束后，開箱門取出培養(yǎng)皿，將未培養(yǎng)皿重新放入（注意觀察水盤中的蒸餾水是否需補充）。若停止培養(yǎng)，則應先將CO2 鋼瓶關(guān)閉，再將空氣流量計和二氧化碳流量計關(guān)閉，CO2 進氣開關(guān)置“0”位置，zui后關(guān)閉總電源。若長期不使用，則應取出水盤，擦干工作室，在CO2 進氣開關(guān)關(guān)閉狀態(tài)下，使CO2 箱在37℃條件下開機2小時，烘干工作室，再切斷總電源?！　　　￠T溫調(diào)節(jié)方法　　　　本機在出廠時，以37℃為基準調(diào)好，如冬天箱內(nèi)玻璃門上水霧大，無法看清箱內(nèi)培養(yǎng)物品，可在CO2 箱內(nèi)后背調(diào)節(jié)門溫旋鈕，向右旋動（即向溫度升高的方向），直至能看清箱內(nèi)物品；如夏天，箱內(nèi)實際溫度高于設置溫度時，則將調(diào)節(jié)旋鈕向左旋動（即向溫度降低的方向）直至箱內(nèi)溫度達到37℃?！　　　★L機調(diào)節(jié)方法　　　　使用中，風量的大小不但會影響箱內(nèi)溫度的均勻度，直至影響控制溫度。若在使用中，風量的過大影響到培養(yǎng)物品，則可在CO2 箱后背調(diào)節(jié)風機轉(zhuǎn)速旋鈕，直至滿足需求?！　　　⌒沦徺I的二氧化碳培養(yǎng)箱要如何連接到二氧化碳鋼瓶？部分新用戶不是很了解，為了讓大家能夠更好地操作，我們今天做個詳細介紹。　　　　二氧化碳培養(yǎng)箱如何連接二氧化碳鋼瓶　　　　首先在鋼瓶上面連接減壓閥（用培養(yǎng)箱專用閥門），再用軟管連接到二氧化碳培養(yǎng)箱的CO2氣體IN進口，軟管兩端用專用卡子固定好，鋼瓶閥門開之前，必須確保減壓閥**關(guān)閉。鋼瓶閥門打開之后，再開減壓閥的小閥門，調(diào)節(jié)好壓力，具體的要控制壓力要設置在合理的壓力范圍內(nèi)。　　　　二氧化碳培養(yǎng)箱一般使用的壓力都不會很高，培養(yǎng)箱都很嬌貴的，所以**要先調(diào)好減壓閥出口的壓力后再連接二氧化碳培養(yǎng)箱。二氧化碳減壓閥裝在鋼瓶上面后就可以用減壓閥調(diào)節(jié)出口壓力了，減壓閥出廠里面都配有調(diào)節(jié)手輪的，把手輪插入減壓閥正面凸出凹洞出輕輕往里面調(diào)節(jié)就可以了，越往里面調(diào)節(jié)二氧化碳減壓閥出口的壓力就越大。先可以試試減壓閥出口壓力穩(wěn)不穩(wěn)定（一般情況下二氧化碳培養(yǎng)箱需要的壓力在0.03mpa-0.06mpa范圍內(nèi)也有用到0.1mpa要看實際情況的，二氧化碳氣體就算放出來點也是沒有什么危險的，其他氣體就要另當別論了），如果確定沒有問題就把手輪給松下來，調(diào)節(jié)手輪松下來后即使鋼瓶是開著的減壓閥的出口也是沒有壓力的，因為減壓閥你不調(diào)節(jié)出口是沒有壓力的，如沒問題便可連接二氧化碳培養(yǎng)箱?！　　　?*使用減壓閥　　　　1、氣瓶放氣或開啟減壓閥時動作必須緩慢。如閥門開啟速度過快，減壓閥工作部分的氣體因受絕熱壓縮而溫度大大提高，這樣有可能使有機材料制成的零件如橡膠填料、橡膠薄膜纖維質(zhì)襯墊著火燒壞，并可使減壓閥**燒壞。另外，由于放氣過快產(chǎn)生的靜電火花以及減壓閥有油污等，也會引起著火燃燒燒壞減壓閥零件?！　　　?、減壓閥安裝前及開啟氣瓶閥時的注意事項：安裝減壓閥之前，要略打開氧氣瓶閥門，吹除污物，以防灰塵和水分帶入減壓閥。在開啟氣瓶閥時，瓶閥出氣口不得對準操作者或他人，以防高壓氣體突然沖出傷人。減壓閥出氣口與氣體橡膠管接頭處必須用退過火的鐵絲或卡箍擰緊；防止送氣后脫開發(fā)生危險。 二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇方法

　　全世界的用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條***基本的要求，一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提?****穩(wěn)定的控制，以便于其研究工作的進展；二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范，并且能夠定期**污染，以保護研究成果，防止樣品損失。所以，選購二氧化碳培養(yǎng)箱的老師***關(guān)心的當然就是其高可靠性、對污染的防范和控制及使用方便。

　　一、溫度控制

　　1. 加熱方式：

　　氣套式加熱和水套式加熱，兩種加熱系統(tǒng)都是**和可靠的，同時它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。

　　水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的，其優(yōu)點：水是一種很好的絕熱物質(zhì)，當遇到斷電的時候，水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準確性和穩(wěn)定性（維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的3～4倍），有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定（如有用電限制，或者經(jīng)常停電）并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件的用戶選用。

　　氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的，又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比，具有加熱快，溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點，特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。此外，對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化（水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗，并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況）。

　　2. 溫控系統(tǒng)：

　　保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素，因此**可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱不可或缺的重要部分。為了使培養(yǎng)箱更加穩(wěn)定的工作，我們推薦用戶選用具備相互獨立三重溫度控制功能的二氧化碳培養(yǎng)箱，即箱內(nèi)溫度控制、超溫報警控制和環(huán)境溫度監(jiān)控。

　　我們知道培養(yǎng)箱的***低工作溫度一般是高于室溫5℃，如果沒有緩慢加熱模式就非常容易在夏天高溫天氣（如室溫30℃左右時）產(chǎn)生箱內(nèi)溫度過高；HF90的獨立超溫報警功能能夠快速準確的在培養(yǎng)箱內(nèi)溫度高于培養(yǎng)溫度1℃時，切斷培養(yǎng)箱的主加熱系統(tǒng)，同時聲光報警；HF90的環(huán)境溫度監(jiān)控可以根據(jù)環(huán)境溫度的變化自 動調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱外門輔助加熱系統(tǒng)的功率，達到**控制箱體內(nèi)溫度的目的。

　　3. 溫度均一性：

　　二氧化碳培養(yǎng)箱箱體內(nèi)的溫度均一性也是用戶需要考慮的主要因素，一般在箱體內(nèi)配備了風扇以及風道的培養(yǎng)箱的均一度要好很多，同時此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2濃度和相對濕度的迅速恢復。

　　當然，風扇/風道的優(yōu)化也是同等重要的，HF90二氧化碳培養(yǎng)箱獨特設計的大直徑風扇和循環(huán)風道能夠保證箱體內(nèi)溫度和二氧化碳濃度的均一性。大直徑風扇相比其他品牌培養(yǎng)箱的風扇，能夠在低轉(zhuǎn)速（低風速）時產(chǎn)生大的空氣循環(huán)流量，在達到均一性目的的同時，降低風速、減少箱內(nèi)震動。降低風速、減少震動同時也就大大提高了箱內(nèi)細胞培養(yǎng)的成功率。

　　二、二氧化碳濃度控制

　　1. 兩種控制系統(tǒng)：

　　紅外傳感器（IR）或熱導傳感器（TCD）進行測量。兩種傳感器都是準確的，但都各有優(yōu)缺點。熱導傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作試驗方法是基于對內(nèi)腔空氣熱導率的連續(xù)測量，輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內(nèi)空氣的熱導率發(fā)生變化，這樣就會產(chǎn)生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。紅外傳感器（IR）它是通過一個光學傳感器來檢測CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器，當箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后，傳感器就可以檢測出紅外線的減少量，而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內(nèi)CO2的水平，從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。由于IR系統(tǒng)是通過紅外線減少來確定箱內(nèi)CO2濃度，而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線，使得IR系統(tǒng)對箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感，因此IR傳感器應用在含HEPA**空氣過濾器的培養(yǎng)箱內(nèi)比較合適。

　　2. CO2測量系統(tǒng)自動校準功能：

　　無論哪種CO2測量系統(tǒng)在使用一段時間后都會產(chǎn)生漂移，而產(chǎn)生漂移后直接會導致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在我們的設定值，致使培養(yǎng)失敗，所以我們在這里強烈建議用戶在選購培養(yǎng)箱時必須要選擇帶有CO2測量系統(tǒng)自動校準功能的培養(yǎng)箱。

　　3. CO2濃度均一性：此點與溫度均一性的要求類似，在此就不做贅述。

　　三、相對濕度

　　箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度（如在開關(guān)門后）才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的（其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右，但開門后濕度恢復速度很慢）。我們在此建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱的時候盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱，因為我們知道濕度蒸發(fā)面積越大，越容易達到**相對飽和濕度并且開關(guān)門后的濕度恢復的時間越短。

　　四、防污染設計和****系統(tǒng)

　　污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素，因而，二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生，其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面，并結(jié)合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。例如，鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長，為確保培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性，相繼問世了多種****方式，如帶有紫外**功能的CO2培養(yǎng)箱；還有的設計生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣，可過濾除去99.97%的0.3微米以上的顆粒；此外，還開發(fā)設計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物，達到****目的的培養(yǎng)箱。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是必不可少，但選擇何種清潔裝置呢？首先，我們考慮的當然是各種方式的**能力，紫外**能力是與紫外燈距離目標的距離的二次方成反比，距離越遠，**能力越差，所以紫外**方式有其局限性，難以達到****的要求；

　　HEPA過濾器由于受到過濾膜孔徑的影響，無法去除病毒和一些微小**，也有其局限性；相比較而言，高溫**是目前比較有效****的方法，高溫**又分為兩類，一是傳統(tǒng)的高溫干熱**，另一種是先進的高溫濕熱**。

　　接下來我們**說一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，因此該法的**效率比干熱**法高。其原因有三：

　?、俚鞍踪|(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān)，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱**的菌體蛋白質(zhì)吸收水分，所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。

　?、跐駸?*過程中蒸汽放出大量潛熱，加速提高濕度。因而濕熱**比干熱所需溫度低，如在同一溫度下，則濕熱**所需時間比干熱短。

　　③濕熱的穿透力比干熱大，使其深部也能達到**溫度，故濕熱比干熱收效好一些。

　　所以高溫**并不是簡單的看**溫度，主要是看是否濕熱**。另外，從使用角度看，濕熱**一般控制在90℃就能達到很**的**效果，整個**過程中培養(yǎng) 箱內(nèi)的所有附件都不用取出，可以**進行**；而干熱**為了達到較好的效果，溫度一般都在100℃以上，在這種溫度下**培養(yǎng)箱內(nèi)的傳感器、HEPA過 濾器等都要在**過程中取出，等**結(jié)束再裝上，這樣即麻煩，附件又不能同時**，而且增加二次污染的幾率，再者要達到100℃以上的高溫，培養(yǎng)箱的加熱 系統(tǒng)的電熱絲必然要加粗，這會導致培養(yǎng)箱的溫度控制難度增加，均一性變差。所以我們建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱時選擇含高溫濕熱**方式的培養(yǎng)箱。

　　五、其它因素

　　二氧化碳培養(yǎng)箱的容積也是一個不可忽略的因素，買小了不夠用，大了又浪費又占地方。二氧化碳培養(yǎng)箱的可選容積非常廣，而且每種類型又有不同的容積可選。此時，就需要您在選購前對所需培養(yǎng)箱容積的范圍有一個比較準確的了解，并在此基礎上多預留一點空間，以保證不時之需。