【***** 使用手冊(cè)】所謂電泳，是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動(dòng)，不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同，因此在電場中運(yùn)動(dòng)速度不同，根據(jù)這一特征，應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析，或?qū)?*混合物進(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備，這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)制造的。下面簡單介紹其使用方法及注意事項(xiàng)。

　　　　一、如何使用電泳槽　　夾芯式垂直電泳槽使用方法：　　1、組成部件　　(1)裝有鉑金絲的貯液槽一對(duì)，配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口?！　?2)凹型橡膠框，配有玻璃板，可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板，操作時(shí)根據(jù)需要選擇適當(dāng)厚度的玻璃板及梳子配套使用?！　?3)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣?！　?4)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對(duì)，28D、30型為5對(duì)?！　?5)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口；中等長度的兩根用于連接電極緩；中液的流出口；zui短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水?！　?6)導(dǎo)線1付?！　?、使用方法　　(1)清洗部件　　上述部件組裝前要**清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框，必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑**清洗干凈。清洗后的玻璃板應(yīng)放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。　　(2)組裝電泳槽　　A、將四只固定螺桿插進(jìn)一只貯液框(半上槽)的相應(yīng)孔洞中，然后將貯液框仰放在桌上；　　左手拿凹型槽橡膠?？?，右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠模框內(nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)；　　將帶有玻璃的橡膠?？蜃臃旁谘龇诺馁A液槽框架上，其下緣必須對(duì)齊貯液槽框下緣；　　雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合，并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機(jī)玻璃框**；　　裝上四只螺母，擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻，用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊；　　將電泳槽垂直豎起，放在桌上，帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰**)，帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽**)，在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入，為防止留存氣泡，可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂**凝固后才能灌膠?！　、也可將槽垂直豎起，將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中，對(duì)稱擰緊螺絲后，用瓊脂封底邊?！　?、灌膠　　(1)先灌分離膠，待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水，夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管?！　?2)用細(xì)頭滴管吸取膠液，沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡，可稍拾起另一端(氣泡往高處走)，不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處，輕輕加少許水，雙手輕輕將梳子插入，待膠凝后就可形成凹形加樣孔?！　?3)為防止漏膠，在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水，但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。　　(4)膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折　　射率不同的亮區(qū)?！　?、加樣　　(1)松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子，放掉槽內(nèi)的蒸餾水，待水流完后，再夾緊夾子。　　(2)雙手輕輕取出樣品梳子，即可看到界線清楚的加樣孔，將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)?！　?3)在上、下貯液槽中加入緩；中液，液體高度應(yīng)超過上貯液槽短玻璃板上緣?！　?40用微量注射器吸取**量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動(dòng)作要輕，針頭不能碰壞膠面)。　　5、電泳　　一貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的負(fù)極相連，下貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤，方可按照所要求的電壓電流進(jìn)行電泳?！　《⒆⒁馐马?xiàng)　　1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端，以防漏電?！　?、儀器通電后，不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞?！　?、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳時(shí)所通過的電流量也不同，其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同，故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行?！　?、在總電流不超過儀器額定電流時(shí)(zui大電流范圍)，可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響儀器壽命?！　?、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí)，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī)，否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng)，容易造成不必要的人為機(jī)器損壞?！　?、使用過程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電源，進(jìn)行檢修，以免發(fā)生意外事故。 電泳槽的常見問題解決介紹

電泳槽時(shí)凝膠時(shí)間不對(duì)，那么通常膠在60min，1H內(nèi)凝；

如果凝的太慢，可能是TEMEN，APS劑量不夠或者失效。

APS應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用，TEMED不穩(wěn)定，容易被氧化成黃色。

如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量過多，此時(shí)膠太硬易裂，電泳時(shí)易燒膠。

紋理和托尾現(xiàn)：

由于樣品溶解不佳引起的，克服的方法可以在加樣前離心，增加一些增溶輔助試劑如尿素。

蛋白帶過寬，與鄰近泳道的蛋白帶相連時(shí)由于加樣量太多，可以減少上樣量。

電泳時(shí)間比正常要長。

可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯(cuò)誤，即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)差別太小，或緩沖系統(tǒng)的離子強(qiáng)度太高。

指示劑成微笑符號(hào)(指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形)，說明凝膠的不均勻冷卻，中間部分冷卻不好，導(dǎo)致分子有不同的遷移率所致。

指示劑成哭臉符號(hào)(指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形)，由于電泳槽的裝置不合適，尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不**。